فحوصات الفعالية المستندة إلى الخلايا
أهمية فحص فعالية mRNA
مع التطور السريع للقاحات والعلاجات من الرنا المرسال، هناك حاجة إلى مجموعة محددة من طرق التحليل لاختبار الفعالية (تحديد نشاطها البيولوجي)، بما في ذلك الكفاءة الانتقالية للرنا المرسال. تعتمد هذه الطرق عادةً على ترنسفكأيشن الخلايا والمقايسات الوظيفية للبروتين المستهدف.
تقدم شركة Yaohai Bio-Pharma فحوصات فعالية قائمة على الخلايا للمواد الدوائية mRNA أو منتجات LNP، بما في ذلك ترنسفكأيشن الخلايا (293T، HepG2، HeLa، K562، U937، خلايا Raw264.7، وما إلى ذلك) وفحوصات ELISA أو Western Blotting (WB).
المتطلبات التنظيمية لفحوصات الفعالية
وفقًا للاعتبارات التنظيمية لمنظمة الصحة العالمية، "يجب تحديد فعالية كل دفعة من اللقاح النهائي باستخدام طريقة (طرق) وظيفية كمية مناسبة ومثبتة صحتها". قد تتضمن فحوصات الفعالية المختبرية المحتملة أنظمة ترنسفكأيشن تعتمد على الخلايا أو فحوصات خالية من الخلايا. وأوصى جامعة جنوب المحيط الهادئ بإجراء "اختبار قائم على الخلايا" لاختبار فعالية mRNA، أي التعبير عن البروتين المستهدف.
المنهج التحليلي
|
تحليل الأداء
|
طرق
|
|
فحوصات الفعالية
|
تحديد ترنسفكأيشن الخلية والبروتين المستهدف:
293T، HepG2، هيلا، K562، U937، خلايا Raw264.7، إلخ.
|
العملية
الخطوة 1. ترنسفكأيشن على أساس الخلية مع مرنا أو مرنا-LNP
يتم استزراع الخلايا ونقلها باستخدام mRNA أو mRNA-LNP. بالتفصيل، يتم نقل mRNA بعد خلطه بكاشف ترنسفكأيشن، في حين يتم نقل mRNA-LNP مباشرة إلى الخلايا. بعد 24-48 ساعة، قم بتوضيح المادة طافية التي تحتوي على البروتين المعبر عنه بالطرد المركزي.
الخطوة 2. المقايسات الوظيفية للبروتين المستهدف
إجراء فحوصات ELISA أو WB لتقييم الارتباط الوظيفي للبروتينات المستهدفة.
دراسة الحالة
فحوصات الفعالية المستندة إلى الخلايا لعينات الرنا المرسال
قامت شركة Yaohai-BioPharma بتطوير طريقة فحص فعالية الخلايا للحمض النووي الريبوزي المرسال (mRNA)، والتي تتضمن زراعة الخلايا وترنسفكأيشن الخلية والمقايسات الوظيفية للبروتين. قمنا بنقل eGFP mRNA و mCherry mRNA و luciferase mRNA و mRNA البروتيني إلى 293T خلية واكتشفنا البروتين المستهدف من خلال التألق أو الإشارة الانارة أو الملونة ، WB ، ELISA.
فحوصات الفعالية المستندة إلى الخلايا لمنتجات mRNA بواسطة Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
لا
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
