في عملية التحضير بالنقل الريبي External Transcription (IVT)، يتطلب البلازميد الخطي كنموذج للنقل الريبي IVT باستخدام بوليمراز RNA T7. يعتبر البلازميد ذو الجودة العالية أمرًا حاسمًا للنقل الريبي الخارجي.
بناءً على منصة خدمة إعداد البلازميد الناضجة، يمكن لشركة Yaohai Bio-Pharma تقديم خدمة إعداد البلازميد الخطي ذو النقاء العالي والمطابق للمعايير لتحقيق نقل ريبوي IVT فعال.
العملية | خدمات إضافية متاحة | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) |
إعداد البلازميد الدائري | تركيب الجين | اصطناع الجين (طرف ثالث) | 7-10 |
تكثيف البلازميد | تكثيف البلازميد | 2 | |
استخراج البلازميد | |||
إعداد البلازميد المُستقيم | تسيير وتنقية البلازميد | تسيير البلازميد | 1 |
تنقية الحمض النووي المستقيم | |||
رقابة جودة الحمض النووي للبلازميد | تركيز النقاء | الطيفي بالموجات فوق البنفسجية (UV) | 1-2 |
شكل البلازميد | فصل الجل الأغاري (AGE) | ||
فصل الرقائقي (CE)-اختياري | |||
تحديد البلازميد | تحديد إنزيمات القيود / AGE |
اختيار مرن لطرق التحويل الخطي
تحسين طرق استخراج وتنقية الحمض النووي لتحقيق نسب استرداد عالية.
معايير صارمة لتحكم العملية، مع معدل تorsion خارق للعينة البلازميدية لأغراض البحث يتجاوز 80%.
خدمات إعداد بلازميدية وضمان جودة ذات معايير عالية وكفاءة عالية لتلبية احتياجات التجارب.
باستخدام منتج mRNA_luciferase من كتالوج Yaohai Bio-Pharma كمثال، فإن عينة القالب البلازميدي (درجة البحث) لديها نسبة تorsion خارق تزيد عن 90٪، ونسبة التحويل الخطي قريبة من 100٪، والنسبة الناتجة للتحويل اللاحق تصل إلى 1:200 (DNA البلازميد المُخطَّط:mRNA).
يتم تحويل RNA_mRNA الذي تم الحصول عليه من خلال إعداد البلازميد المُخطَّط كقالب في خلايا 293T، وتقييم نشاط التفاعل الإنزيمي-المادة الدقيقة بعد 24 ساعة من التحويل.
يمكن الكشف عن إشارة نشاط قوي واضح للإنزيم Luciferase، أي أن بروتين Luciferase يتم التعبير عنه بكفاءة، مما يشير إلى أن نقاء القالب الوراثي يمكنه تمامًا تلبية متطلبات إعداد RNA عالي الجودة.
اختبار نسبة البلازميد الملفوفة فائقاً
التحقق من تعبير الرنا المرسال للوسيفيراز في البيئة المعملية