يتطلب إعداد CircRNA استخدام RNA الخطي كمادة أولية (RNA سلف) للتحوير الدائري، حيث يتم إعداد المادة الأولية عادة باستخدام البلازميد الخطي كقالب للنسخ، ويتم النسخ خارج الجسم مع مساعدة من تروبوز T7 RNA.
الحمض النووي البلازميدي ذي الجودة العالية ضروري للنسخ في المختبر (IVT). بناءً على منصة خدمة إعداد البلازميد الناضجة، يمكن لشركة Yaohai Bio-Pharma تقديم خدمة إعداد بلازميد ذو نقاء عالي ومعايير خطية لضمان سلامة منتجات IVT.
العملية | خدمات إضافية متاحة | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم عمل) |
إعداد البلازميد الدائري | تركيب الجين | اصطناع الجين (طرف ثالث) | 7-10 |
تكثيف البلازميد | تكثيف البلازميد | 2 | |
استخراج البلازميد | |||
إعداد البلازميد المُستقيم | تسيير وتنقية البلازميد | تسيير البلازميد | 1 |
تنقية الحمض النووي المستقيم | |||
رقابة جودة الحمض النووي للبلازميد | تركيز النقاء | الطيفي بالموجات فوق البنفسجية (UV) | 1-2 |
شكل البلازميد | فصل الجل الأغاري (AGE) | ||
فصل الرقائقي (CE)-اختياري | |||
تحديد البلازميد | تحديد إنزيمات القيود / AGE |
اختيار مرن لطرق التحويل الخطي
تحسين طرق استخراج وتنقية الحمض النووي لتحقيق نسب استرداد عالية.
معايير صارمة لتحكم العملية، مع معدل تorsion خارق للعينة البلازميدية لأغراض البحث يتجاوز 80%.
خدمات إعداد بلازميدية وضمان جودة ذات معايير عالية وكفاءة عالية لتلبية احتياجات التجارب.
باستخدام منتج Yaohai Bio-Pharma mCherry circRNA كمثال، فإن نسبة التorsion للعينات البلازميدية (لأغراض البحث) تتجاوز 70%، بمعدل تlinearization يقترب من 100%.
يتم إعداد mCherry circRNA باستخدام البلازميد المlinearized كقالب ونقله إلى خلايا 293T. يتم الكشف عن مستوى عالٍ من التعبير عن الفلورسنت (الفلورسنت الأحمر) بعد 24 ساعة من النقل، وسيزداد بعد 48 ساعة، ويمكن ما زالت الكشف عنه في اليوم السابع واليوم الرابع عشر بعد النقل.
يتم التعبير عن بروتين mCherry بشكل مستقر وكفؤ، ويمكن أن تلبي نقاء القالب الtranscription متطلبات منتج الدواء circRNA (DP) ذو الجودة العالية.
التحقق من التعبير في المختبر لـ mCherry circRNA