RNA الدائري (circRNA) تم استخدامه على نطاق واسع في دراسة وظائف الجينات أو البروتينات. وفي الوقت نفسه، فهو شائع في تطوير الأدوية الوقائية والعلاجية، مشابهة لـ RNA الرسول.
قامت Yaohai Bio-Pharma بتطوير مجموعة من تقنيات التركيب الخاصة بـ circRNA لتوفير RNA عالي الجودة، مثل تصميم التسلسل وتحسينه، النسخ الاصطناعي (IVT)، التدوير/التحوير، التنقية، وتعبئة الجسيمات النانوية الشحمية (LNP). يتم إصدار جميع المنتجات وفق معايير صارمة للتحكم في الجودة (QC).
مقارنة مع الحمض النووي الريبي المخطي (mRNA)، فإن الحمض النووي الريبي الدائري (circRNA) أكثر استقرارًا من الناحية الهيكلية، وهو نقطة ساخنة رئيسية في الأبحاث الحالية حول أدوية الحمض النووي. لديه تطبيقات واسعة في مجالات مختلفة، سواء كان circRNA مشفرًا أو غير مشفر، بما في ذلك لقاحات الوقاية من الأمراض المعدية، واللقاحات العلاجية لأمراض السرطان، والأدوية العلاجية للسرطان، وعلاج استبدال البروتين، والطب التجديدي، والعلاج بالخلايا والجينات (CGT)، ودور الإسفنج الجزيئي ومركب RNA الرباعي.
العملية | خدمات إضافية متاحة | تفاصيل الخدمة | فترة التسليم (يوم) |
تصميم وتحسين تسلسل circRNA | تصميم وتحسين التسلسلات المشفرة | تحسين كودون CDS | 1 |
تصميم وتحسين التسلسلات غير المشفرة | تصميم وتحسين تسلسلات الإنترن والإكسون، الذراع المتجانسة والمجال الفاصل | 1-2 | |
إعداد البلازميد الدائري | تركيب الجين | اصطناع الجين (طرف ثالث) | 7-10 |
تكثيف البلازميد | تكثيف البلازميد | 2 | |
استخراج البلازميد | |||
إعداد البلازميد المُستقيم | تسيير وتنقية البلازميد | تسيير البلازميد | 1 |
تنقية الحمض النووي المستقيم | |||
النسخ الريبي External وتكوين الحلقة | النسخ الريبي External وتكوين الحلقة | تفاعلات النسخ الريبي External وتكوين الحلقة | 1-2 |
هضم RNase R | |||
التحسين - الاختياري | تكوين الاستجابة، تحسين الوقت | 2-5 | |
تنقية circRNA | طريقة التصفيح التقليدية | تبلور كلوريد الليثيوم | 1 |
تصفيح الحبيبات المغناطيسية | 1 | ||
تصفيح circRNA عالي النقاء | كروماتوجرافي السوائل ذا الأداء العالي التحضيري (HPLC) | 1-2 | |
تبديل المحلول المنجّز | الترشيح الفائق | 1 | |
تجفيف circRNA | تعبئة العينة | ملء | 2-3 |
التجميد بالتجفيف | التجميد المسبق | ||
التجفيف الأولي (التحلل) | |||
التجفيف الثانوي (الانفصال) | |||
تغليف circRNA-LNP | التغليف بجزيئات LNP | معالجة المواد والسوائل المسبقة | 2 |
خلط أجهزة الميكروفلوديك | |||
تبديل المحلول المنجّز | ترشيح التدفق المماس | 1 | |
معقم | الترشيح | ||
التحكم في جودة الحمض النووي البلازميدي | التركيز/النقاء | الطيفي بالموجات فوق البنفسجية (UV) | 1-2 |
شكل البلازميد | فصل الجل الأغاري (AGE) | ||
فصل الرقائقي (CE)-اختياري | |||
تحديد البلازميد | تحديد إنزيم القيود/AGE | ||
التحكم في جودة circRNA | التركيز/النقاء | الطيفي بالموجات فوق البنفسجية (UV) | - |
نقاء | فصل الجل الأغاري (AGE)/E-Gel | 0.5 | |
HPLC-اختياري | 1 | ||
التحكم في جودة circRNA-LNP | كفاءة التغليف | طريقة RiboGreen | 1 |
حجم الجسيمات | تشتت الضوء الديناميكي (DLS) | 1 | |
مؤشر التوزيع المتعدد | تشتت الضوء الديناميكي (DLS) | 1 | |
القوة الزيتية | تشتت الضوء الديناميكي (DLS) | 1 | |
اختبار الفعالية القائمة على الخلايا | نقل الجينات إلى الخلايا | زراعة الخلايا، نقل الجينات إلى الخلايا | 4 |
اكتشاف البروتين المستهدف | الملاحظة بالتوهج، البلمرة الغربية/اختبار ELISA | 1-3 |
قمنا بنقل RNA الدائري المحسن للبروتين المتوهج الأخضر (eGFP circRNA)، وRNA الدائري mCherry، وRNA الدائري للفوسفاز إلى خلايا 293T، واكتشفنا البروتين المستهدف من خلال الإشارات المتوهجة، أو الضوئية أو اللونية، والبلمرة الغربية (WB)، واختبار الامتصاص المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA).
اختبارات فعالية RNA الدائري القائمة على الخلايا بواسطة Yaohai Bio-Pharma