Zgodnie z głównym dogmatem informacyjny RNA (mRNA) jest pomostem umożliwiającym transmisję materiału genetycznego z DNA do białek.
mRNA odgrywa rolę biologiczną poprzez kodowanie białek in vivo, a dojrzały mRNA w organizmach eukariotycznych składa się z pięciu składników: 5' Cap (struktura czapeczki), 5' UTR (region niekodujący), ORF (otwarta ramka odczytu), 3ʹ UTR i 3' ogon poliA (ogon poliadenylanowy).
Szczegóły usług
| Przetwarzanie | Usługa opcjonalna | Szczegóły usługi | Okres dostawy (dzień) |
| Projektowanie i optymalizacja sekwencji mRNA | Projektowanie i optymalizacja sekwencji kodujących | Dopasowanie sekwencji CDS Optymalizacja kodonów CDS | 1 |
| Projektowanie i optymalizacja sekwencji niekodujących | Projektowanie i optymalizacja sekwencji 5' UTR Projektowanie i optymalizacja sekwencji 3' UTR Projektowanie i optymalizacja sekwencji poliA | 1-2 |
Konfigurowalne opcje
| 5'UTR/3'UTR | - Sekwencja natury UTR
- Zmutowana/zmodyfikowana sekwencja UTR
|
| 3' ogon PolyA | - Ogon 100A ~120A (zalecany)
- Segmentowany ogon z poliA
- Inny niestandardowy ogon
|
Typowe strategie projektowania sekwencji mRNA
| Składniki mRNA | Funkcje biologiczne | Strategie optymalizacji |
| Czapka 5' | Chroni mRNA przed degradacją przez egzonukleazy i działa wspólnie z ogonem poliA na końcu 3', białkiem wiążącym poliA i białkiem czynnika inicjacji translacji w celu zainicjowania translacji białka. | Naturalna struktura Cap1 pozwala uniknąć receptorów rozpoznających wzorce, a tym samym zmniejsza naturalną odpowiedź immunologiczną, którą można osiągnąć poprzez jednoetapowe capping kotranskrypcyjny lub dwuetapowe capping enzymatyczny [więcej szczegółów można znaleźć w artykule capping enzymatyczny mRNA i capping kotranskrypcyjny]. |
| 5'UTR | 5'UTR może być rozpoznawany przez rybosomy, regulować translację mRNA i wpływać na stabilność mRNA. | Zawierają sekwencje Kozaka bez bardzo stabilnej struktury drugorzędowej. Naturalne UTR genów o wysokiej ekspresji są preferowane w przypadku mRNA transkrypcji in vitro (IVT), takich jak α-globina i β-globina. |
| CDS | Regiony kodujące białka i sekwencje kodujące antygeny, przeciwciała lub inne białka funkcjonalne. | Optymalizacja kodonów zwiększa poziom translacji, zauważając, że pewne nieoptymalne kodony mogą odgrywać rolę w zwijaniu białek. |
| 3'UTR | Reguluj translację i stabilność mRNA. | W przypadku mRNA IVT, takich jak α-globina i β-globina, preferowane są naturalne UTR genów o wysokiej ekspresji. |
| 3' ogon poliA | Regulują ekspresję białek i chronią strukturę czapeczki przed degradacją. | Wymagana jest odpowiednia długość (100-150 pz); kodowanie ogona poliA na plazmidzie matrycowym transkrypcji zapewnia bardziej określoną długość ogona poliA. |
Nasze funkcje
- Zróżnicowany wybór źródła UTR
Wiele źródeł wysoce eksprymowanych bibliotek naturalnych i zmodyfikowanych UTR; dojrzała strategia modyfikacji UTR;
- Najnowocześniejszy zespół optymalizacji CDS
Współpracuj z profesjonalnym zespołem algorytmów AI, aby zakończyć optymalizację kodonów.
- Równomierny rozkład ogona poliA
Dodaj sekwencje poliA zgodnie z szablonami DNA, aby dokładniej kontrolować długość mRNA.
- Zróżnicowane kombinacje optymalizacyjne
Osiągnij wydajną ekspresję mRNA o niskiej immunogenności.
Case study
Projekt sekwencji mRNA z podwójnym reporterem: mRNA mCherry-eGFP
Usługa mRNA firmy Yaohai Bio-Pharma jest w dalszym ciągu udoskonalana poprzez projektowanie i optymalizację sekwencji tandemowej podwójnego genu reporterowego, która umożliwia koekspresję podwójnych genów.
Stosując konwencjonalny odczynnik do transfekcji, mRNA mRNA mCherry-eGFP o podwójnej sekwencji genu transfekuje się do komórek 293T i wykrywa się dwa sygnały fluorescencyjne mCherry (czerwony) i białko o wzmocnionej zielonej fluorescencji (eGFP) z jednoczesną ekspresją po 48 godzinach, a ułożone w stos wykres jest podświetlony na żółto.
Ekspresja mRNA mCherry-eGFP w komórce 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NIE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
