Podstawą encapsulacji jest projektowanie i rozwijanie systemu dostarczania. Dobrze zaprojektowany system dostarczania umożliwia cząsteckom circRNA wejście do organizmu bez ulegania degradacji przez enzymy RNA, a następnie efektywne dostarczenie do miejsca docelowego, przekroczenie błony komórkowej i uwolnienie się wewnątrzkomórkowo.
Nanocząstki lipidowe (LNPs) są najlepszym dostępnych systemem dostarczania, z zaletami w zakresie enkapsulacji, wyrażania in vivo oraz bezpieczeństwa in vivo w porównaniu do innych systemów dostarczania. LNPs z fragmentami kwasu nukleinowego są łatwo pochłaniane przez komórki i tworzą ciała komórkowe. Po wejściu do komórki, kwaśne środowisko ciała komórkowego protonuje i dodaje dodatni ładunek na głowę jonizowanego lipidu, co powoduje fuzję z wewnętrzną błoną ciała komórkowego i uwolnienie docelowego kwasu nukleinowego do komórki w celu działania.
Usługa circRNA Yaohai Bio-Pharma nieustannie się doskonali i może oferować usługę enkapsulacji circRNA-LNP w celu optymalizacji kluczowych parametrów procesowych oraz poprawy spójności i powtarzalności produkcji leku circRNA.
Proces | Szczegóły usług | Okres dostawy (Dzień) | Dostarczane materiały |
obejście circRNA-LNP | Wstępne przetwarzanie materiału i cieczy | 2 | produkt lekowy circRNA-LNP (DP) |
Mieszanie w urządzeniu mikrofluidycznym | |||
Filtracja przepływem stycznym | 1 | ||
Filtracja sterylizująca | |||
kontrola jakości circRNA-LNP | Efektywność enkapsulacji | 1 | Raport testowy |
Rozmiar cząstek i indeks polidyspersji | |||
Potencjał Zeta |
Szybka synteza, wysoka efektywność R&D oraz wstępnie zoptymalizowane rozwiązania;
Stosunek otulania może osiągnąć ponad 90%;
Rozmiar lipidowych nanoparticle można kontrolować poprzez zmianę tempa i proporcji wstrzykiwania płynu;
Produkty circRNA-LNP są walidowane przez wyrażanie in vitro w komórkach i mogą efektywnie wyrażać białko docelowe.
Próbki LNP-eGFP circRNA są przygotowywane, a różne dawki (1ug, 2ug i 4ug) są bezpośrednio transfekowane do komórek 293T, aby zweryfikować, czy mogą one wyrażać białko docelowe. Po 48 godzinach transfekcji można zaobserwować wyraźne sygnały fluorescencyjne, a intensywność fluorescencji ma charakter zależności od dawki.
Lipo-circ_eGFP, składający się z liposomu i nieenkapsulowanego eGFP circRNA, jest brany jako kontrola.