Alle categorieën
ENEN
Tag-vrije eiwitbereidingsdiensten

Tag-vrije eiwitbereidingsdiensten

Home >  Tag-vrije eiwitbereidingsdiensten

Tag-vrije eiwitbereidingsdiensten

Eiwittags, als fusiepartners die worden gebruikt in recombinant-DNA-technologieën, maken effectieve, eenstaps-affiniteitszuivering mogelijk voor verschillende eiwitten/peptiden met verschillende kenmerken. Ondanks dit belangrijke voordeel kunnen tags als exogene aminozuren de eiwitstructuur en biologische functies veranderen. Daarom hebben niet-gelabelde (tag-vrije) eiwitten of peptiden meer de voorkeur om de veiligheid en werkzaamheid te garanderen, vooral op biofarmaceutisch gebied. Een recombinant eiwit met een fusietag heeft beperkte mogelijkheden voor het verkrijgen van autorisatie van medische/geneesmiddelentoedieningsinstanties.

Gebaseerd op het R&D-platform voor microbiële biologische geneesmiddelen, biedt Yaohai Bio-Pharma op maat gemaakte, niet-gelabelde (Tag-vrije) eiwitbereidingsdiensten die zijn gericht op het voldoen aan unieke doelstellingen voor onderzoek, ontwikkeling en productie voor klinisch gebruik.

Trefwoorden: tag-vrije eiwitproductie, niet-getagde eiwitzuivering, gratis tag-gebaseerde eiwitbereiding, tagloze eiwitexpressie en -zuivering, zeer tag-vrije doeleiwit Toepassing: onderzoek naar menselijke geneeskunde, ontwikkeling van diergeneesmiddelen, ontwikkeling van recombinante vaccins, recombinant groot molecuul biologische productie


Ons microbiële R&D-platform

We hebben ervaring met microbiële stamtechniek, fermentatie en productzuivering.

Bacteriën: Escherichia coli (E. coli)

Gist: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Aangepaste opties

ModaliteitRecombinant eiwit
StartmaterialenGensequenties, recombinant plasmide of gemanipuleerde stammen
DeliverablesZuiveren: >80%, >85%, >90% Hoeveelheid: 0.2~10 g (te bepalen door het project)
Expressiesysteem en vormingE. coli periplasmatische secretie, oplosbare en inclusielichaamexpressie; Intracellulaire of secretie-expressie van gist
Analyse methodenUltraviolet (UV), bicinchoninezuurtest (BCA), Bradford of Lowry voor hoeveelheid Natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE) voor zuiveringstests Optioneel: Western blot (WB), enzymgekoppelde immunosorbenttest (ELISA), hoge prestaties vloeistofchromatografie (HPLC)
Resterende onzuiverhedenEndotoxine (optioneel)

Dienstendetails

Dienstendienst DetailsMinimale tijdlijn (werkdag)
Gen syntheseCodonoptimalisatie voor specifieke expressiehost7 ~ 10 dagen
Gen synthese
Plasmide/vectorconstructieKlonering in plasmide/vector2 dagen
Plasmide-transformatie
Verificatie van de polymerasekettingreactie (PCR), vertering van restrictie-enzymen, gensequencing3 dagen
Eiwitexpressie in E. coliPlasmide-transformatie,2 dagen
Teelt in schudfles3 dagen
Gisting in 7 liter, optimalisatie4 dagen/batch
Tag-vrije eiwitzuivering, optimalisatie5 ~ 10 dagen / batch
Testen door natriumdodecylsulfaatpolyacrylamidegelelektroforese (SDS-PAGE)
Eiwitexpressie in gistPreparaat van gistcompetente cellen4 dagen
Plasmidelinearisatie en elektrotransformatie
Gisting in 7 liter, optimalisatie5 dagen
Tag-vrije eiwitzuivering, optimalisatie7 dagen/batch
Tag-vrije eiwitzuivering5 ~ 10 dagen / batch
QC door SDS-PAGE

Aanvullende services (optioneel)

Ontwikkeling van fermentatieprocessen

Tag-vrije ontwikkeling van eiwitzuiveringsproces

Pilot opschaling en GMP-productie

Analyse en testen

Onze kenmerken

We hebben aan meer dan 300 ontwikkelde microbiële stammen gewerkt, waaronder E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaRoze soort 1/2/3/4; en H. polymorpha.

We hebben ervaring met periplasmatische secretie van E. coli, expressie van oplosbare en inclusielichaampjes, evenals intracellulaire of secretie-expressie van gist.

We zetten een screeningplatform met hoge doorvoer op om hoogproductieve en stabiele stammen van meer dan honderd kandidaatstammen te screenen.

Ontvang een gratis offerte

Neem contact op