De betekenis van spanningstechniek
Strain engineering heeft tot doel de expressie een host te maken met kenmerken van verwachtingen, wat noodzakelijk is voor de biologische CMC-ontwikkeling en de kwaliteit en consistentie van het product en het productieproces bepaalt.
Trefwoorden: genetische manipulatie en screening van stammen, constructie van eiwitexpressiestammen, microbiële celmanipulatie, engineering van bacteriestammen, engineering van giststammen, constructie van prokaryotische micro-organismen, engineering van eukaryote micro-organismen, gemanipuleerde stam
Toepassing: menselijke geneeskunde, diergeneeskunde, vaccin, synthetische biologie, recombinante biologische geneesmiddelen met grote moleculen, biologisch reagens
Stamengineeringdiensten van Yaohai Bio-Pharma
Door te profiteren van meer dan 10 jaar CDMO-ervaring op het gebied van microbiële biologische geneesmiddelen, hebben we rijke ervaringen opgebouwd met de engineering en selectie van verschillende soorten plasmidevectoren en microbiële gastheren (bacteriën, gisten). Wij kunnen het beste expressiesysteem voor uw unieke biologische geneesmiddelen vinden.
We hebben verschillende microbiële gastheren verzameld met duidelijke bronnen en standaard CoA, inclusief
bacteriën: Escherichia coli (E. coli)
Gist: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
dienst Details
Services
|
dienst Details
|
Minimale tijdlijn/dag
|
Deliverables
|
Spanningstechniek
|
Gen-knock-out of gen-verwijdering
|
TBD
|
Strain engineering rapport
|
Gen-knock-in of gen-insertie
|
Spanningsconstructie (E. coli)
|
Plasmidetransformatie (multi-hosts)
|
5
|
COA van commerciële hosts,
Bouwverslag spanning
|
PCR-verificatie
|
Stamzuivering
|
Behoud van de stam
|
Stamconstructie (gist)
|
Bereiding van competente gistcellen
|
10
|
Linearisatie van plasmiden
|
Elektro-transformatie
|
Screening op resistentie/voedingstekorten
|
Stamzuivering
|
Behoud van de stam
|
Geschikte gastheerscreening
|
Plasmide- of genoom-DNA-extractie
|
15-20
|
Hostscreeningproces,
Testrapport van gemanipuleerde stammen
|
PCR-verificatie, vertering van restrictie-enzymen
|
Doelgensequencing
|
Screening van gastheren met hoge expressie
|
Screening van gastheren met genetische stabiliteit
|
Behoud van de stam
|
Casestudies
Engineered Hansenula polymorpha verbeterde de opbrengst van HPV L1 VLP-expressie.
We hebben gist ontwikkeld Hansenula polymorpha (H. polymorpha) engineering- en screeningplatform voor expressie van recombinante eiwitten/peptiden. Ten eerste hebben we gegenereerd H. polymorpha stammen met proteasedeficiëntie door gerichte gendeletie. Ten tweede werd een vector die het HPV L1-gen draagt, getransformeerd in de competente H. polymorpha cel. Ten slotte screenen we uit honderden opties de beste kloon, met genetische stabiliteit en hoogproductieve eigenschappen.
Onze servicefuncties
We hebben expertise aangetoond in verschillende microbiële gastheren, bijvoorbeeld Escherichia coli (E. coli) DH5a, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaRoze stam 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) en Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Wij hebben er ervaring mee E. coli periplasmatische secretie, oplosbare en inclusielichaamexpressie, evenals intracellulaire of secretie-expressie van gist.
We voegen geen antibiotica toe of voegen de antibiotica toe onder wettelijke richtlijnen.
We zetten een screeningplatform met hoge doorvoer op om hoogproductieve en stabiele stammen van meer dan honderd kandidaatstammen te screenen.
We zorgen ervoor dat het proces van stamengineering en screening traceerbaar is, onder goed gegevens- en recordbeheer.