mRNA wordt veel gebruikt bij de studie van gen- of eiwitfuncties. Ondertussen is het gebruikelijk bij de ontwikkeling van profylactische en therapeutische biologische geneesmiddelen. Als een gebruikelijke synthesestrategie voor RNA-moleculen stelt in vitro transcriptie (IVT) ons in staat om op efficiënte wijze aangepaste transcripties te verkrijgen.
Yaohai Bio-Pharma heeft een reeks mRNA-synthesetechnologieën ontwikkeld om RNA van hoge kwaliteit te leveren, zoals sequentieontwerp en -optimalisatie, IVT, zuivering, lyofilisatie en inkapseling van lipidenanodeeltjes (LNP). Alle producten worden vrijgegeven onder strenge kwaliteitscontrolenormen (QC).
Met het uitbreken van de COVID-19-pandemie in 2020 is de mRNA-technologie met grote sprongen vooruitgegaan, en het daarmee samenhangende onderzoek en de toepassingen ervan hebben een ongekende ontwikkeling doorgemaakt, waaronder profylactische vaccins voor de preventie van infectieziekten, therapeutische oncologische vaccins en medicijnen, tumortherapie, proteïne vervangingstherapie, regeneratieve geneeskunde en cel- en gentherapie (CGT).
mRNA-vaccin | mRNA-therapieën |
|
Proces | Optionele dienst | dienst Details | Leveringsperiode (werkdag) | Leverbaar |
mRNA-sequentieontwerp en -optimalisatie | Ontwerp en optimalisatie van coderende sequenties | CDS-sequentieontwerp en codonoptimalisatie | 1-3 | Sequentiebestand |
Ontwerp en optimalisatie van niet-coderende sequenties | Ontwerp en optimalisatie van UTR, polyA-sequenties | |||
Transcriptiesjabloon Plasmidebereiding | Recombinante plasmidebereiding | Gen synthese | 7-10 | |
Plasmideamplificatie en extractie | 4 | |||
Plasmide-linearisatie en -zuivering | ||||
mRNA-in-vitrotranscriptie | Co-transcriptionele capping (eenstapsmethode) | In vitro transcriptie (IVT) / Cap-analoog | 1-2 | NB |
Nucleotidemodificaties (UTP/CTP-modificaties) | ||||
Verwijdering van DNA-sjabloon (DNase I) | ||||
Enzymatische capping (proces in twee stappen) | IVT | 2-3 | ||
Nucleotidemodificaties (UTP/CTP-modificaties) | ||||
Verwijdering van DNA-sjabloon (DNase I) | ||||
mRNA-zuivering (lithiumchloride/magnetische kralen) | ||||
Enzymatische aftopping | ||||
mRNA-zuivering | Conventioneel zuiveringsschema | Neerslag van lithiumchloride | 1 | mRNA-medicijnsubstantie |
Magnetische parelzuivering | ||||
Zuiveringsschema voor chromatografiekolommen | Combinatie van meerdere chromatografiemethoden | 1-2 | ||
Buffer uitwisseling | Ultrafiltratie | 1 | ||
mRNA-lyofilisatie | vriesdrogen | Voorvriezen | 2-3 | mRNA gevriesdroogd poeder |
Primaire droging (sublimatie) | ||||
Secundaire droging (desorptie) | ||||
mRNA-inkapseling | LNP-inkapseling | LNP-inkapseling | 2-3 | mRNA-LNPDrugproduct |
Concentratie en bufferuitwisseling | ||||
mRNA-kwaliteitsanalyse | mRNA-medicijnsubstantie / gelyofiliseerd poeder | Concentratie, zuiverheid | 1 | Test rapport |
Integriteit, aftoppingsefficiëntie, polyA-staartdistributie | 2-5 | |||
mRNA-LNP-medicijnproduct | Inkapselingsefficiëntie | 1 | ||
Deeltjesgrootte en distributie | ||||
Oppervlakte lading | ||||
mRNA-expressievalidatie | Evaluatie van 293T-cellen | Celbeplating | 4 | |
Voorbijgaande transfectie van cellen | ||||
Observatie van fluorescentiesignalen | 1-3 | |||
Western blot (WB)/Enzym-gekoppelde immunosorbenttest (ELISA) |
5' Kap | ▪ Niet afgetopt ▪ Cap0, co-capped ▪ Cap1, co-capped ▪ Cap1, enzymatische capping |
5'UTR/3'UTR | ▪ Aard UTR-reeks ▪ Mutante/engineered UTR-sequentie |
3' PolyA-staart | ▪ 100A ~120A staart (aanbevolen) ▪ Gesegmenteerde polyA-staart ▪ Andere aangepaste staarten |
Gemodificeerde nucleosiden | ▪ Ongemodificeerde basissen ▪ Pseudouridine (Ψ) ▪ N1-Methylpseudouridine (N1Ψ) ▪ 5-methylcytosine (m5C) ▪ 5-methyluridine (m5U) ▪ 5-methoxyuridine (5moU) ▪ 2-thiouridine (s2U) ▪ 2′-O-methyl-U ▪ Overige wijzigingen |
Geïntegreerde servicestroom
Bied een reeks diensten aan, van front-end sequentieontwerp tot back-end mRNA-voorbereiding, kwaliteitscontrole en expressievalidatie.
Internationaal baanbrekend sequentieontwerp en optimalisatie
Professioneel ontwerp en optimalisatie van mRNA-sequenties vergemakkelijken efficiënte mRNA-expressie.
Gediversifieerde nucleotidemodificaties
Verhoog effectief de mRNA-expressie en verminder nadelige immuunreacties van mRNA.
Volwassen zuiveringsplatform
Door een conventionele en zelfontworpen zuiveringsmethode te combineren, worden mRNA-monsters met een hoge zuiverheid verkregen
Compleet QC-platform
Verrijk de QC-opties om te voldoen aan de vereisten van routinetests, zoals concentratie, A260/280-zuiverheid en integriteit, evenals aan hoge kwaliteitscontrolevereisten, zoals capping-efficiëntie/polyA-distributie.
Snelle levering
Op maat gemaakt mRNA kan binnen 7 dagen worden geleverd, behalve bij uitbestede sequentiesynthese.