Analyse van N-glycosylatieplaatsen is cruciaal voor het begrijpen van de functies van glycanen. Yaohai Bio-Pharma maakt gebruik van vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LC-MS) na enzymatische splitsing voor de N-glycosylatieplaats.
We zijn betrokken geweest bij de eiwitstructurele karakterisering van verschillende grote moleculen, waaronder recombinante subeenheidvaccins, nanobodies/VHHs/single-domein antilichamen (sdAbs), antilichaamfragmenten, hormonen/peptiden, cytokinen, groeifactoren (GF), enzymen, collagenen, enz.
Regelgevende vereisten voor N-glycosylatielocaties
Volgens de ICH Q6B-richtlijn wordt “voor glycoproteïnen het koolhydraatgehalte (neutrale suikers, aminosuikers en siaalzuren) bepaald. Bovendien worden de structuur van de koolhydraatketens, het oligosacharidepatroon (antennair profiel) en de glycosyleringsplaats(en) van de polypeptideketen zo goed mogelijk geanalyseerd.
Analytische methode
Analyse |
Methoden |
N-glycosylatieplaats |
Vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LC-MS) na enzymatische splitsing |
procedures
1. Enzymvertering van het eiwit met behulp van trypsine of een ander protease
2. Afzonderlijke fragmentglycopeptiden
3. Bevestig de N-glycosylatieplaats met LC-MS
4. Analyseer gegevens