Bepaling van het molecuulgewicht door LC-MS
Het intacte molecuulgewicht is altijd erkend als een belangrijk kenmerk van biologische geneesmiddelen. Analyse van het intacte molecuulgewicht wordt gebruikt om de eiwit/peptideproducten aan te tonen en de biologische stoffen te verifiëren. Het meten van het molecuulgewicht is een vereiste van de wettelijke richtlijnen.
Yaohai Bio-Pharma biedt intacte molecuulgewichtsanalyse onder natieve, gereduceerde, N-gedeglycosyleerde omstandigheden. We maken gebruik van vloeistofchromatografie-massaspectrometrie (LC-MS) om het intacte molecuulgewicht te bepalen.
Regelgevende vereisten voor molecuulgewicht
In de ICH Q6 wordt aanbevolen dat “het molecuulgewicht (of de grootte) wordt bepaald met behulp van grootte-uitsluitingschromatografie, SDS-polyacrylamidegelelektroforese (onder reducerende en niet-reducerende omstandigheden), massaspectrometrie (MS) en andere geschikte technieken”.
Analytische methodes
| Analyse |
Methoden |
| moleculair gewicht |
LC-MS / vloeistofchromatografie/elektrospray-massaspectrometrie (LC/ES-MS) van natieve, gereduceerde, N-gedeglycosyleerde eiwitten of subeenheden |
Analytische procedures
Intact molecuulgewicht:
- Uitvoeren van LC-MS op het oorspronkelijke monster zoals ontvangen.
- LC-MS Gegevensanalyse.
Verminderd molecuulgewicht:
- Het behandelen van het eiwitmonster met een geschikt reductiemiddel;
- Het uitvoeren van LC-MS op het gereduceerde eiwit;
- LC-MS Gegevensanalyse.
N-gedeglycosyleerd molecuulgewicht:
- Het verwijderen van de N-glycanen met een geschikt enzym;
- Het uitvoeren van LC-MS op het N-gedeglycosyleerde eiwit;
- LC-MS Gegevensanalyse.
Verlaagd en N-gedeglycosyleerd molecuulgewicht:
- Het behandelen van het eiwitmonster met een geschikt reductiemiddel;
- Het verwijderen van de N-glycanen met een geschikt enzym;
- Uitvoeren van LC-MS op gereduceerd en N-gedeglycosyleerd eiwit;
- LC-MS Gegevensanalyse.
Eiwitsubeenheid Molecuulgewicht:
- Subeenheidsplitsing
- Uitvoeren van LC-MS op eiwitsubeenheid
- LC-MS-gegevensanalyse
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NEE
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
