Sveiki! Vai esat kādreiz domājuši, kā zinātnieki var klonēt RNS? RNS ir šī īpašā molekula, ko mēs atrodam mūsu šūnās, kas veic daudzas darbības, lai ražotu olbaltumvielas, un olbaltumvielas ir tur, lai mūsu ķermenis varētu darīt visu, kas nepieciešams. Šajā daļā mēs apskatīsim daudz ziņkārīgāko protokolu, ko izmantojuši pētnieki: In vitro transkripts. Un viss, kas nozīmē, ir tas, ka zinātnieki ņem RNS un lielu daļu no tās ražo mēģenē (kas ir šī mazā burciņa, ko izmanto laboratorijas), tāpēc ļaujiet ķerties pie katra soļa šeit.
Pabeidzot savu iepriekšējo ierakstu, es sapratu, ka pēdējais, iespējams, ir bijis neliels, pievienojies jautrībai mitrajā laboratorijā; tātad, atbilstoši formai tagad, kad esat labi un patiesi uz jautru (sic RNS veidošanas) vilcienu: Kādi reaģenti un citi būs nepieciešami jūsu EF? Lai to paveiktu, mums būs nepieciešami īpaši proteīni, ko sauc par fermentiem, kas ir identiski Yaohai produktam Rekombinantā Midkine ražošana. Tas katalizē ķīmiskās reakcijas, šie fermenti palīdz sadalīties. Tāpēc tagad mums ir nepieciešams tikai mūsu DNS fragments. Šī funkcija ir DNS, ko mēs izmantojam kā veidni, lai kopētu mūsu RNS. Ir vajadzīgas arī papildu regulējošās sekvences RNS, proti, nukleotīdi. Šie nukleotīdi ir kā mazi celtniecības bloki, kas ir jāsamontē, lai izveidotu RNS. Mēs izmantojam arī īsas maza diametra caurules, lai garšas novērtējumu pārvērstu citās. Visbeidzot, mums ir nepieciešama iekārta (termocikleris), kas nodrošina, ka mūsu reakcijas ir pareizajā temperatūrā. Turklāt jebkuriem eksperimentiem mums var būt nepieciešami daži rīki un produkti.
Tātad šeit lietas atšķiras, mums ir viena RNS virkne, un tagad mums patīk vairāk tās kopiju, arī Konjugētu VLP vakcīnu ražošana izstrādāja Yaohai. Veids, kā sasniegt, lai izmantotu citu fermentu; T7 RNS polimerāze. Šis unikālais enzīms, piemēram, atpazīst noteiktas RNS zonas. lēciena konuss, lai šajā procesā izgatavotu daudz vairāk RNS kopiju. Šajā brīdī T7 RNS polimerāze RNS virknei pievienos vairāk, līdz tiks izveidota transkripta masa vai līdz mēs liksim tai pārtraukt.
Kad esam izolējuši RNS, cik vien iespējams, ritiniet uz leju, lai redzētu, kā tīrīt, un uzglabāt RNS turpmākai lietošanai. Rods: Dažas no šīm metodēm ir nedaudz vairāk ekstrēmas attiecībā uz RNS izolāciju — jūs ne vienmēr to izmantotu, bet dažreiz tas ir nepieciešams noteiktiem eksperimentu veidiem. Kad mūsu RNS ir atbrīvota no jebkādiem piesārņotājiem, to var uzglabāt sasaldētu. Tādā veidā tas ir droši, un mēs to vēlāk varam izmantot dažādos eksperimentos.
Izejmateriāla kvalitāte: pārliecinieties, vai jūsu DNS veidne ir tīra un vai tā nav izdegusi. Varat arī papildināt ar svaigi atjaunotiem nukleotīdiem un tikko atkausētiem fermentiem, lai palielinātu veiksmīga eksperimenta izredzes.
Precizējošie apstākļi Visi fermenti un to nukleotīdi darbojas labāk noteiktā temperatūrā un pH jūsu ķermenī, kā arī Yaohai's Sarkanā fluorescējošā mRNS. Tagad nedaudz pielāgojiet niansi starp nosacījumiem, līdz nokļūsit vietā, kur ir jūsu unikālās iestatīšanas atslēga.
Reversā transkriptāze ir neparasts enzīms, jo tas veido DNS kopiju no RNS molekulas. Mēs izmantojām gan DNS, gan DNS veidni (cDNS) kā ievadi mūsu in vitro transkripcijas metodei RNS ģenerēšanai. Tomēr lielākajā daļā eksperimentu zinātnieki vēlas pārrakstīt DNS uz RNS. Reversās transkripcijas nosaukums ir tāds pats kā mRNS poli-A izplatības pārbaude izgatavots Yaohai. Tas ir nenovērtējams rīks visā zinātnē — no RNS molekulu izpētes šūnās līdz komplementāru DNS virkņu ražošanai turpmākiem eksperimentiem.
Reālās dzīves eksperimenti, kuros RNS ir viens no visbiežāk izmantotajiem molekulārajiem instrumentiem kopā ar Yaohai produktu VLP vakcīnas ražošana E. coli. Kvantitatīvie testi: šie testi var atklāt jebkuras konkrētas molekulas daudzumu, kas atrodas paraugā. Piemēram, zinātnieki var sintezēt RNS kopiju in vitro transkripta preparātu, kas iegūts no mērķa gēna, kas atrodas šūnā. Pēc tam diagnostika var noteikt šīs kopijas, ja tās ir. meklējot RNS, diagnostika var veikt polimerāzes ķēdes reakciju (PCR), lai paraugā pastiprinātu šīs kopijas. Tas ļauj zinātniekiem redzēt, kā gēni tiek ekspresēti šūnās, un pat ļauj veikt dažus ļoti augstas caurlaidības testus, piemēram, bakteriālas vai vīrusu infekcijas klātbūtni, un diagnosticēt ģenētiskus traucējumus.
In vitro Transcript Protocol ir vadošais mikrobu bioloģisko CDMO. Mūsu uzmanības centrā ir mikrobi ražotas vakcīnas un ārstniecības līdzekļi, kas ir piemēroti cilvēku, veterināro, kā arī mājdzīvnieku veselības pārvaldībai. Mums ir vismodernākās RD platformas un ražošanas tehnoloģijas, kas aptver visu procedūru, sākot ar mikrobu celmu izstrādi un šūnu banku izstrādi, līdz procesu un metožu izstrādei, līdz komerciālai un klīniskai ražošanai, kas nodrošina veiksmīgu inovatīvu risinājumu piegādi. Laika gaitā mēs esam uzkrājuši plašas zināšanas par bioloģisko apstrādi uz mikrobiem. Ir veiksmīgi pabeigti vairāk nekā 200 projekti, un mēs palīdzam saviem klientiem ievērot tādus noteikumus kā ASV FDA un ES EMA. Mēs arī palīdzam viņiem orientēties Austrālijas TGA un Ķīnas NMPA. Mūsu profesionālā pieredze un plašā pieredze ļauj mums ātri reaģēt uz tirgus prasībām un nodrošināt individuālus CDMO pakalpojumus.
Yaohai Bio-Pharma ir pieredze tādu bioloģisko vielu ražošanā, kas radītas, izmantojot in vitro transkripta protokolu. Mēs piedāvājam pielāgotus RD un ražošanas risinājumus, vienlaikus pārliecinoties, ka nav nekādu risku. Mēs esam bijuši iesaistīti dažādās modalitātēs, piemēram, rekombinantās apakšvienību vakcīnās, peptīdu hormonos, citokīnās, augšanas faktoros, viena domēna antivielu enzīmos, plazmīdu DNS MRNS un daudzās citās. Mēs esam daudzu mikroorganismu, tostarp rauga ekstracelulārās un intracelulārās sekrēcijas (raža līdz 15g/L), kā arī baktēriju intracelulārā šķīstošā un iekļaušanas ķermeņa (raža līdz 10g/L) speciālisti. Mēs esam arī izveidojuši BSL-2 fermentācijas platformu, lai izveidotu baktēriju vakcīnas. Mēs koncentrējamies uz procesu uzlabošanu, produktu ražas palielināšanu un ražošanas izmaksu samazināšanu. Izmantojot spēcīgu tehnoloģiju komandu, mēs varam nodrošināt ātru un uzticamu projektu piegādi, kas ātrāk parādīs jūsu produktu tirgū.
Yaohai Bio-Pharma, 10 populārākais bioloģisko produktu ražotājs, specializējas mikrobu fermentācijā. Mēs esam izveidojuši modernu iekārtu ar stabilām RD iespējām un modernu aprīkojumu. Mums ir piecas zāļu vielu ražošanas līnijas, kas atbilst LRP prasībām attiecībā uz mikrobu fermentāciju un attīrīšanu. Mums ir arī divas automatizētas uzpildes un apdares līnijas kārtridžiem, flakoniem un pilnšļircēm. Izmantošanai pieejamie fermentācijas svari svārstās no in vitro Transcript Protocol līdz 2000L. Specifikācijas flakona pildīšanai ir no 1 ml līdz 25 ml. pilnšļirces vai kārtridžu uzpildes specifikācijas svārstās no aptuveni 1-3 ml. Mūsu cGMP saderīgā ražotne nodrošina pastāvīgu klīnisko paraugu, kā arī komerciālo preču piegādi. Mūsu rūpnīca ražo lielas molekulas, kuras tiek nosūtītas uz pasauli.
Yaohai BioPharma ir 10 populārākais mikrobu CDMO, kas ietver in vitro transkripta protokolu, kā arī regulējuma lietas. Mums ir kvalitātes vadības sistēma, kas atbilst pašreizējiem GMP standartiem, kā arī globālajiem noteikumiem. Mūsu regulatīvo ekspertu komanda pārzina globālos normatīvos regulējumus, lai paātrinātu bioloģisko palaišanu. Mēs nodrošinām izsekojamus ražošanas procesus kvalitatīvus produktus, kā arī atbilstību ASV FDA un ES EMA noteikumiem. Arī Austrālijas TGA un Ķīnas NMPA ir apmierinātas. Yaohai BioPharma ir veiksmīgi izturējis Eiropas Savienības kvalificētās personas (QP) auditu uz vietas mūsu GMP kvalitātes sistēmai, kā arī mūsu ražotnei. Turklāt mēs esam veikuši pirmos ISO9001 kvalitātes vadības sistēmas, ISO14001 vides vadības sistēmas un ISO45001 arodveselības un darba drošības vadības sistēmas sertifikācijas auditus.