Firefly luciferāzes (F-Luc) mRNS ekspresē luciferāzes proteīnu, kas sākotnēji izolēts no ugunspuķes Photinus pyralis. Šis proteīns izstaro bioluminiscenci substrāta luciferīna klātbūtnē.
Firefly luciferāzes mRNS parasti izmanto kā pozitīvu kontroli mRNS transfekcijā un piegādes sistēmas attīstībā. Firefly luciferāzi var izmantot arī zīdītāju šūnu kultūrā, lai noteiktu gan gēnu ekspresiju, gan šūnu dzīvotspēju.
Yaohai Bio-Pharma piedāvā nemodificētu vai N1Ψ modificētu Firefly luciferāzes mRNS, ar Cap1 struktūru, optimizētiem kodoniem, inženierijas UTR un 110nt polyA asti, lai uzlabotu mRNS stabilitāti un translācijas efektivitāti.
Produkts
Firefly luciferāzes mRNS, Cap1, poli(A) aste, nemodificēta vai modificēta mRNS
Produkta apraksts
| Produkts |
Firefly luciferāzes mRNS |
| Kaķis Nē |
mP003 |
| RNS saturs |
100 µg ~ 10 mg (OD260) |
| Tīrība |
A260 / A280 |
| Identificēt un tīrība |
Agarozes gēla elektroforēze (AGE) |
| 5'Cap |
Cap1 |
| 3' poli(A) aste |
110±5 nt |
| Bāzes modifikācija |
Nepārveidots, N1Ψ |
| Buferis |
RNāzes nesaturošs ūdens (šķidrums) |
| Piegāde |
Kuģis ar sauso ledu; vai zem apkārtējās vides temperatūras |
| glabāšana |
Šķidrums, -20°C vai zemāk; Liofilizēts pulveris, 4°C |
| iesniegums |
Reportiera gēni, pozitīvā kontrole |
Citas pielāgojamas opcijas
| 5' Cap |
● Bez vāciņa
● Cap0, co-capped
● Cap1, co-capped
● Cap1, enzīmu ierobežošana
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Dabas UTR secība
● Mutants/inženierizēta UTR secība
|
| 3' PolyA Tail |
● 100A ~ 120A aste (ieteicams)
● Segmentēta poliA aste
● Cita pielāgota aste
|
| Modificēti nukleozīdi |
● Nemodificētas bāzes,
● pseidouridīns (Ψ),
● N1-metilpseudouridīns (N1Ψ),
● 5-metilcitozīns (m5C),
● 5-metiluridīns (m5U),
● 5-metoksiuridīns (5 moU),
● 2-tiouridīns (s2U),
● 2′-O-metil-U
● pārējie
|
mRNS sagatavošana un šūnu ekspresija
Linearizētas plazmīdas DNS (pDNS) uzņemšana F-Luc mRNS kodējot gēnus kā IVT veidni, mēs ieguvām tīrus F-Luc mRNS transkriptus, veicot koptranskripcijas ierobežošanu un attīrīšanu, ar cap1 struktūru un N1Ψ modifikāciju.
Tīra F-Luc mRNS (1 μg), kas sajaukta ar komerciālu transfekcijas reaģentu, tika transficēta 293T šūnās 96 iedobju plāksnē. Un luciferāzes tests tika veikts pēc 24 stundām.
Firefly luciferāzes mRNS ekspresija 293T šūnās
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NĒ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
