N-glikozilinimo vietos analizė yra labai svarbi norint suprasti glikanų funkcijas. Yaohai Bio-Pharma naudoja skysčių chromatografijos-masių spektrometriją (LC-MS) po fermentinio skilimo N-glikozilinimo vietai.
Mes dalyvavome įvairių didelių molekulių baltymų struktūriniame apibūdinime, įskaitant rekombinantines subvienetų vakcinas, nanokūnus / VHH / vieno domeno antikūnus (sdAb), antikūnų fragmentus, hormonus / peptidus, citokinus, augimo faktorius (GF), fermentus, ir tt
N-glikozilinimo vietos reguliavimo reikalavimai
Remiantis ICH Q6B gairėmis, „glikoproteinuose nustatomas angliavandenių (neutralių cukrų, amino cukrų ir sialo rūgščių) kiekis. Be to, kuo geriau išanalizuojama angliavandenių grandinių struktūra, oligosacharidų modelis (antentinis profilis) ir polipeptidinės grandinės glikozilinimo vieta (-os).
Analitinis metodas
Analizė |
Metodai |
N-glikozilinimo vieta |
Skysčių chromatografija-masių spektrometrija (LC-MS) po fermentinio skilimo |
procedūros
1. Baltymų virškinimas fermentu, naudojant tripsiną ar kitą proteazę
2. Atskirkite glikopeptidų fragmentus
3. Patvirtinkite N-glikozilinimo vietą LC-MS
4. Analizuoti duomenis