Disulfidiniai ryšiai kartais vadinami SS jungtimis arba disulfidiniais tiltais. Disulfidiniai tilteliai veikia biologinių medžiagų, tokių kaip peptidai, baltymai ir antikūnai, biologinį aktyvumą.
Yaohai Bio-Pharma siūlo disulfidinių jungčių analizės paslaugas, daugiausia pagrįstas skysčių chromatografijos-masių spektrometrija (LC-MS).
Mes dalyvavome įvairių didelių molekulių baltymų struktūriniame apibūdinime, įskaitant rekombinantines subvienetų vakcinas, nanokūnus / VHH / vieno domeno antikūnus (sdAb), antikūnų fragmentus, hormonus / peptidus, citokinus, augimo faktorius (GF), fermentus, ir tt
Disulfidinių jungčių reguliavimo reikalavimai
Skirtinguose biologiniuose preparatuose yra skirtingas disulfidinių tiltelių skaičius ir formacijos, kuriuos reikėtų visapusiškai įvertinti baltymų apibūdinimo tyrimų metu, jei numatomoje produkto pirminėje aminorūgščių sekoje yra aminorūgšties cisteino. Tai taip pat reikalaujama iš norminio dokumento ICH Topic Q6B.
Analizės metodai
Analizė |
Metodai |
Disulfidinės jungtys |
Skysčių chromatografija-masių spektrometrija (LC-MS) po virškinimo |
Norėdami gauti reikiamus duomenis, kad būtų galima visapusiškai įvertinti disulfidinius tiltelius ir laisvuosius tiolius, Yaohai Bio-pharma mokslininkai atlieka peptidų kartografavimą po virškinimo su specifine proteaze. Po to analizuokite naudojant tiesioginę LC/elektropurškimo jonizacijos masės spektrometriją (ES-MS) ir (arba) LC/ES-MS/MS prieš ir po redukavimo.
Yaohai Bio-pharma taip pat gali atlikti Ellman testą, kuris yra svarbi bet kurio visiškai cisteino turinčio produkto vertinimo dalis. Atlikdami Elmano testą, sulfhidrilus paverčiame dariniais, naudodami (5,5'-ditio-bis-[2-nitrobenzenkarboksirūgštį]). Norint nustatyti laisvųjų tiolių kiekį, gautas produktas analizuojamas UV spektrofotometrija esant 412 nm.