Vamzdinio proceso (DSP) kūrimo svarba
Visas fermentacijos audinys sudaro tikslusis baltymas ar plazmidas bei produktui ir procesui susijusios taršos medžiagos, pvz., agregatai, mikroorganizmų ląstelių substraatas, mitybos ląstelės baltymai (HCP), mitybos ląstelės DNS (HCD), endotoxinai ir antibiotikai.
Taigi, yra pagrindinė svarbos sukurti efektyvų DSP, purifikavimo procesą, kuris pašalins tam tikras taršas ir padarys gausiai purifikuotą ir aukštos kokybės vaistinę medžiagą. Be to, purifikavimo proceso optimizavimas gali padėti didinti produkto atgavimą, sumažinti išlaidas ir pagerinti proceso masiškumą ir atkuriamumą.
Raktažodžiai: procesų kūrimas, optimizavimas ir patvirtinimas, šalinimo procesas, chromatografija, nepageidaujamų medžiagų eliminavimas, HCP šalinimas, HCD eliminavimas, endotoxinų šalinimas, baltymų denatūracija ir atnaujinimas, VLP sudėtis, jungimas
Pristatymas: biomedicinos pramonė, žmoniška medicina, gyvūnų medicina, vakcinos, rekombinantiniai dideliųjų molekulių biologiniai gaminiai, rekombinantiniai biologiniai gaminių, biologinis reagentas
Yaohai Bio-Pharma DSP sprendimai
Turime plačią patirtį tikslaus baltymo ar plazmido izoliavimo iš sudėtingų junginių, kuriant ir optimizuojant tolesniųjų šalinimo procesus. Yra įvairių vienetinių operacijų tipų, tinkančių biologinių junginių šalinimui, įskaitant centrifugavimą, filtravimą, homogenizavimą, alkaulinę lizę, ultrafiltravimą, precipitavimą, baltymų denatūraciją ir atnaujinimą, chromatografiją ir kt.
Mūsų galimos šalinimo kūrimo paslaugos apima:
- Viso šalinimo proceso kūrimas nuo ląstelės ar viršutinio srauto surinkimo iki paskutinio aktyvaus ingrediento.
- Purifikavimo proceso optimizavimas, remiantis produktui ir procesui susijusiais taršytojais, siekiant pagerinti produkto kokybę ir saugumą, pavyzdžiui, HCP, HCD, endotoxinai.
- Pagrindinių parametrų apibrėžimas ir optimizavimas vienoje ar keliuose technologinių operacijų etapuose, įskaitant ląstelės lydymą, tangencialią srauto filtraciją, šilpno tyrimą, chromatografiją, baltymo denatūraciją ir atnaujinimą ir kt.
- Proceso optimizavimas pagal kokybę, grąžą, atkuriamumą, išlaidas ir masės gamybos galimybes.
- Nepriklausomos dalies purifikavimo proceso patvirtinimas.
- Rizikos pagrįstas parametrų diapazono vertinimas ir eksperimentų planavimas (DoE) procese modeliuojant.
Paslaugų detalės
Standartizuotos baltymų ar plazmido purifikavimo platformos yra grindžiamos keliais primityvių purifikavimo žingsniais ir mažiau nei keturiais chromatografijos žingsniais, įskaitant fiksavimą, tarpinį purifikavimą ir galutinį suplaminti.
| Paslaugų detalės |
Jedinių operacijų |
Parametrai |
| Primityvus purifikavimas |
Centrifužavimas |
Sukimosi greitis, laikas |
| Aukštos slėgio homogenizavimas |
Bendras džiovos turinys, Slėgis, Ciklai |
| Nepakinama alkaline lizė |
Resuspenduotų ląstelių ir lizės sprendinių santykis, Lizės laikas |
| Tangencialus srautas suodinimo |
Membranos medžiaga ir poročių dydis, Priedo srauto greitis Transmembrano slėgis (TMP), Filtrato tūrio prie membranos ploto santykis |
| Sedimentacija |
Sedimentatoriaus tipas ir koncentracija, Priedas, pH, Temperatūra, Laikas |
| Denaturavimas ir renaturavimas |
Įtraukinių būdų proteino suliolijavimas |
Denaturantų koncentracija (pavyzdžiui, Urea, Guanidinas HCl, stipus joninis šablonas), Šablonai (pavyzdžiui, Dodecilsulfatas natrio, SDS), Oksiduojantys agentai (pavyzdžiui, Diftiotreitolis, DTT), Chelatavimo agentai (Etilenediaminetetraacetas, EDTA), Temperatūra, Laikas |
| Baltymų susiformavimas |
Susiformavimo metodai (diliacija, dializė ar SEC susiformavimas), Baltymų koncentracijos, Buferiai, pH, Temperatūra, Laikas, Oksiduojantys ir redukuojantys agentai (pavyzdžiui, Glutatė, GSH/Oxiduota glutatė, GSSH, DTT/GSSH, Cisteina/Cistinas), Maži molekulių pridedamieji (L-argininas, Urea, Guanidinas/HCl, ir šablonai) |
| Ištraukimas, tarpinė šalinimo procedūra ir galutinio šalinimo procedūra |
AC (Afiniška chromatografija) |
Kelių tipų chromatografijos žiedas/stulpelis (pvz., AC, IEX, HIC, SEC, RPC, MMC), Stulpelio ilgis ir skersmuo, Buferio sudėtis, Injekcijos kiekis, Judriojo judesio sudėtis (sąveika ir atsiskirtis), pH, Srauto greitis, Susiejimo, Plovimo ir Atsičiavimo sąlygos. |
| IEX (Anionų ar Kationų keitimo chromatografija) |
| HIC (Hidrofobinio sąveikos chromatografija) |
| Šalinimas ir/arba dydžio atskyrimo chromatografija (SEC) |
| RPC (Atvirkštinės fazės chromatografija) |
| MMC, Mišriųjų režimų chromatografija |
Praktinis pavyzdys
ATVEJAS 1
Mums užsakoma kurti ir optimizuoti tolimesniųjų pašalinimo procesą, kad būtų padidinta baltymų garsumas iš 85% iki 90%, tuo tarpu sumažinant chromatografijos etapus.
Yaohai pristatė tvirtą ir masės skalės tinkamą šalinimo procesą su 3 chromatografijos etapais tiksliniam baltymui, bakteriniams alergenams. Galutinis garsumas pasiekė 95%.
ATVEJAS 2
Yaohai buvo paskirta mūsų klientu optimizuoti endotoxinų šalinimo procesą viruso panašiems dalelėms (VLP) vakcinos.
Mūsų komanda atliko chromatografijos parametrų optimizavimą ir parengė medikamentinį medžiagą su 98% garsumu ir endotoxinų likučiais 12,8EU/mg.
Mūsų patirtis
- Esame įsitraukę į skirtingų didelių molekulių, įskaitant rekombinacinius subvieneto vakcinos, VLPs, hormonus (insulinas, GLP-1, augimo hormonas), citokinus (Interleukinas-2/IL-2, IL-15, IL-21), augimo veiksnius (EGF, FGF, NGF), nanotiklius/pavienio domeno antikūno (sdAbs), enzymus ir kt., kūrimą ir gamybą.
Įrenginiai
Naudojame pramoninėje srityje vartojamas AKTA Pure, AKTA Avant ir Paruoštinės HPLC sistemas įvairių chromatografijos metodų, įskaitant afinitetinę, joninį mainą, hidrofobinį sąveiką, atvirkštinę fazę ir dydžio atskyrimo chromatografiją, vykdymui.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
