Helló. Tudsz elképzelni, hogy hogyan tudnak a tudósok klónozni egy RNA-molekulát? Az RNA egy speciális molekula, amelyet a sejteinkben találhatunk, és sok mindent csinál annak érdekében, hogy fehérjeket gyártson, és ezek a fehérjék olyanok, hogy a testünk megtehesse minden helyes dologot. Ebben a részben végighaladunk egy messze érdekesebb protokollon, amit a kutatók alkalmaznak: az in vitro transzkriptcióra. És mindössze azt jelenti, hogy a tudósok RNA-t gyárnak nagy mennyiségben egy tesztőrlőben (ami egy kis vödör, amit a laborok használnak), tehát most menjünk be minden lépésbe.
Amikor elvégeztem az előző bejegyzést, feltétlenül elismertem, hogy az utolsó lehet, hogy egy kicsit száraz volt - csatlakozz a zsenihez a fürdőben írott posztokhoz; tehát, mostantól már teljesen a zseni (RNA-gyártás) vonatán vagyunk: Milyen reagentumokat és mit fogsz igényelni az EF-höz?? Ennek eléréséhez speciális fehérjéket, azaz enzimeket fogunk igénybe venni, amelyek azonosak Yaohai termékével Rekombinált Midkine Gyártás . Katalizálja a kémiai reakciókat, ezek az enzimsek segítenek a bomlásban. Most már csak egy kis DNA-t kell szerezni. Ez a függvény a DNA, amit sablonként használunk az RNA másolásához. További szabályozó sorozatok az RNA-ben, nevezetesen nukleotidák is szükségesek. Ezek a nukleotidák olyan kis építőelemek, amelyeket összerakni kell, hogy RNA-t kapjunk. Rövid csöveket is használunk kis átmérőben, hogy a ízlési értékelést beilleszthessük a többi közé. Végül, egy gép (termosztat) kell, ami biztosítja, hogy a reakcióink a megfelelő hőmérsékleten maradjanak. Továbbá, esetleges kísérletekhez néhány eszköz és termék is szükséges lehet.
Itt tér el a folyamat, van egy RNA-láncunk, és most több másolatot szeretnénk készíteni belőle, Konjugált VLP oltóanyagok gyártása amit Yaohai fejlesztett ki. A cél eléréséhez egy másik enzim használatára van szükség: a T7 RNA polimeráz. Ez az egyedi enzim például specifikus területeket ismert fel az RNA-ban. Egy ugró konet használva sok több RNA-másolatot hozhatunk létre a folyamat során. Ezen a ponton a T7 RNA polimeráz hozzáad further RNA-láncokat, amíg egy nagy mennyiségű transcript nem keletkezik, vagy amíg nem mondjuk megne leálljon.
Miután lehető legjobban elkülönítettük az RNA-t, tovább lehet görgetni ahhoz, hogy megtudja, hogyan tisztítani és tárolni az RNA-t későbbi használatra. Rhoades: Néhány módszer egy kicsit inkább szélsőértékű az RNA izolálásában – nem mindig használnánk azt, de néha bizonyos típusú kísérletekhez szükséges. Amikor az RNA már teljesen tisztítva van a szennyező anyagoktól, fagyasztott formában tárolható. Így biztonságosan el lehet őrizni, és később felhasználható a különböző kísérletekben.
Kezdőanyag minősége: győződjön meg arról, hogy a DNA-sablon tiszta és nem ég meg minden. Frissen összeállított nukleotidokkal és újran takarított enzimekkel is kiegészítheti, hogy maximalizálja a sikeres kísérlet esélyét.
Feltételek finomhangolása Az összes enzim és nukleotid jobban működik egy adott hőmérsékletén és pH-ban a testünkben, valamint a Yaohaiéban. Piros fluoreszciós mRNA . Most finomhangolja a feltételeket egy kicsit, amíg nem találja meg a kulcsot az Ön egyedi beállításához.
A fordított transkriptázó egy ritka enzim, mivel egy DNA másolatot készít egy RNA molekuláról. Mindkét DNAt és a DNA-sablon (a cDNA) használtuk bemenetként az in vitro transzkriptiós módszert alkalmazva az RNA előállítására. Azonban a legtöbb kísérletben a tudósok akarnak DNA-t transzkribálni RNA-vá. A fordított transzkripció innen ered a neve ugyanaz mint mRNA poly-A Eloszlás Tesztelése amit Yaohai készített. Ez egy értékes eszköz a tudományosság minden területén - Tól az RNA molekulák tanulmányozását a sejtekben, igénybevéve komplementer DNA-szálak előállítását további kísérletekhez.
Valós életbeli kísérletek, amelyekben az RNA egyik leggyakrabban használt molekuláris eszköz, mellett Yaohai termékeivel VLP vakcina termelés E. coli-ban mennyiségi vizsgálatok: Ezek a tesztek felmutathatják bármely adott molekula mennyiségét egy mintában. Például, a tudósok in vitro tranzkript előkészítést szintézizhetnek az RNA másolataiból, amelyek egy célzott géntől származnak egy sejtben. A diagnosztika ezután megmérheti azokat a másolatokat, abban az esetben, ha RNA-t keresnek, a diagnosztika polimeráz láncreakciót (PCR) futtathat annak érdekében, hogy növelje azokat a másolatokat egy mintában. Ez lehetővé teszi a tudósok számára, hogy lássák, hogyan fejeznek ki magukat a gének a sejtökön, és akár engedélyezze néhány extrém mértékű nagy átviteli képességű vizsgálatot is, például a bakteriális vagy vírusos fertőzés jelenlétének, valamint a genetikai zavarok diagnosztizálásának.
az in vitro Transcript Protocol a vezető szereplő a mikrobiológiai biológiás CDMO területén. A figyelmeinket a mikrobiálisan termelt oltásokra és gyógyszerekre irányítjuk, amelyek alkalmasak emberi, állati és háziállatok egészségügyi kezelésére. A legmodernebb RD platformokkal és gyártási technológiákkal rendelkezünk, amelyek fedik az egész folyamatot, kezdve a mikrobiális társadalom fejlesztésétől és a sejtbankok létrehozásától, át a folyamat- és módszerfejlesztésen, végezve a kereskedelmi és klinikai termeléssel, amely biztosítja innovatív megoldások sikeres kézbesítését. Az idő múlva nagyrészt megszerezted a mikrobia alapú biofeldolgozás ismeretét. Több mint 200 projekt sikeresen befejezve, és segítjük az ügyfeleinket az US FDA és EU EMA szabályozásoknak való megfelelésben. Segítünk nekik az Australia TGA és Kína NMPA navigálásában. Professzionális tapasztalataink és bőséges élményeink lehetővé teszik számunkra, hogy gyorsan reagáljunk a piaci igényekre és személyre szabott CDMO szolgáltatásokat nyújtsunk.
A Yaohai Bio-Pharma tapasztalattal rendelkezik in vitro Transcript Protocol alapján létrehozott biológikumok gyártásában. Testreszabott kutatási és fejlesztési (RD) valamint gyártási megoldásokat kínálunk, miközben biztosítjuk a kockázatok mentesülését. Részvetelünk volt széles körű modalitásokban, mint például az altétavaccinerek rekombinált, peptid hormonok, citokinák, növekedési tényezők, egydomainos antitestek, enzimek, plazmid DNA MRNA, és sok más területen. Szakterünetünk számos mikroorganizmus terén, beleértve a torját extracelluláris és intracelluláris sécrétációját (eddig 15g/L-es teljesítményt ért el), valamint a baktériumok intracelluláris oldható anyagait és inklúziós testeket (eddig 10g/L-es teljesítményt ért el). Emellett létrehoztunk egy BSL-2 fermentációs platformot baktériumi oltások előállítására. Fókusztartozunk a folyamatok fejlesztésére, a termékkiadaság növelésére és a gyártási költségek csökkentésére. Egy erős technológiai csapat segítségével garantálhatjuk a projektek időben történő és megbízható végrehajtását, amely gyorsabban hozza piacra a termékeket.
A Yaohai Bio-Pharma, a biológiai termékek területén az első tíz gyártó között részt vevő vállalat, mikrobiológiai fermentációban specializál. Egy modern telephelyt építettünk, amely erős K+É képességekkel és haladó eszközökkel rendelkezik. Öt anyagtömegyártó vonalunk van, amelyek megfelelnek a GMP követelményeknek a mikrobiológiai fermentáció és tisztítás szempontjából. Rendelkezésre áll két automatizált töltési sorozat kartridzshek, vödörök és előtöltött injekciók számára. A használatra vonatkozó fermentációs méretektől az in vitro Transcript Protocol-tól 2000L-ig terjednek. A vödör töltésének specifikációi 1ml-től 25ml-ig terjednek, míg az előtöltött sziring vagy kartridzs töltésének specifikációi kb. 1-3ml között helyezkednek el. cGMP-szabványoknak megfelelő gyártási telephelyünk biztosítja a klinikai minták és a kereskedelmi termékek folyamatos ellátását. Gyárunk nagy molekulákat gyárt, amelyeket világszerte szállítunk.
A Yaohai BioPharma a Top 10-ben szereplő mikrobiológiai CDMO, amely in vitro Transcript Protokollal és szabályozási ügyekkel foglalkozik. Van egy minőségmentőrendszerünk, amely illeszkedik az aktuális GMP szabványokhoz és a globális előírásokhoz. A szabályozási szakértőink megtapasztaltak a globális szabályozási keretrendszerekben, hogy gyorsítsák a biológiai termékek kibocsátását. Biztosítjuk a nyomon követhető gyártási folyamatok minőségi termékeit, valamint betartjuk az Egyesült Államok FDA-jának és az EU EMA-jának szabályait. Az Ausztrália TGA-ja és a Kínai NMPA is elégedett. A Yaohai BioPharma sikeresen átmentette az európai Unió Minőséges Személy (QP) helyszíni ellenőrzését a GMP minőségi rendszerünk és gyártó létesítményünk érdekében. Emellett megszereztem az első tanúsítási ellenőrzéseket az ISO9001 Minőségmentő Rendszer, az ISO14001 Környezeti Menedzsment Rendszer és az ISO45001 Munkahelyi Egészségügyi és Biztonsági Menedzsment Rendszer tekintetében.