Sziasztok. Elgondolkozott már azon, hogyan klónozhatnak a tudósok egy RNS-t? Az RNS ez a különleges molekula, amelyet sejtjeinkben találunk, és amely egy csomó dolgot tesz fehérjék előállításához, és a fehérjék ott vannak, így a testünk minden megfelelő dolgot meg tud tenni. Ebben a részben bemutatjuk a kutatók által használt sokkal érdekesebb protokollt: az In vitro átiratot. És ez csak annyit jelent, hogy a tudósok RNS-t vesznek, és nagy részét egy kémcsőben állítják elő (ezt a kis tégelyt, amit a laboratóriumok használnak), úgyhogy itt térjen ki minden lépésre.
Miután befejeztem az előző bejegyzésemet, rájöttem, hogy az utolsó egy kis szárazon jött, csatlakozzon a mulatsághoz a vizes laborban posztok voltak; szóval, a formának megfelelően most, hogy jól és igazán a mókás (sic RNS-készítő) vonaton van: Milyen reagensekre és c-reagensekre lesz szüksége az EF-hez? Ennek eléréséhez speciális fehérjékre lesz szükségünk, úgynevezett enzimekre, amelyek megegyeznek a Yaohai termékével Rekombináns Midkine gyártás. A kémiai reakciókat katalizálja, ezek az enzimek segítik a lebontást. Tehát most már csak a DNS-ünkre van szükségünk. Ez a funkció az a DNS, amelyet sablonként használunk az RNS-ünk másolásához. Az RNS-ben további szabályozó szekvenciákra, nevezetesen nukleotidokra is szükség van. Ezek a nukleotidok olyan apró építőelemek, amelyeket össze kell szerelni az RNS előállításához. Rövid, kis átmérőjű csöveket is alkalmazunk, hogy az ízértékelést másba alakítsuk. Végül szükségünk van egy gépre (termociklusra), amely gondoskodik arról, hogy reakcióink megfelelő hőmérsékletűek legyenek. Ezenkívül bizonyos kísérletekhez szükségünk lehet néhány eszközre és termékre.
Tehát itt a dolgok eltérnek, van egy RNS-szálunk, és most szeretnénk több másolatot készíteni belőle, a Konjugált VLP vakcinák gyártása Yaohai fejlesztette ki. Más enzim használatának elérési módja; T7 RNS polimeráz. Ez az egyedülálló enzim például felismer bizonyos területeket az RNS-en belül. egy ugrókúp, amellyel az eljárás során sokkal több RNS-másolatot készíthet. Ezen a ponton a T7 RNS-polimeráz további mennyiséget ad az RNS-szálhoz, amíg létre nem jön a transzkriptum tömege, vagy amíg azt mondjuk, hogy hagyja abba.
Miután izoláltuk az RNS-t, amennyire csak lehetséges, görgessen lejjebb, hogy megtudja, hogyan tisztítsa meg, és tárolja az RNS-t későbbi felhasználásra. Rhoades: Néhány ilyen módszer egy kicsit a szélsőséges oldalon áll az RNS izolálása szempontjából – ezt nem mindig használnád, de néha bizonyos típusú kísérletekhez szükség van rá. Ha RNS-ünk mentes minden szennyeződéstől, akkor fagyasztva tárolható. Így ez biztonságos, és később felhasználhatjuk a különböző kísérletekben.
A kiindulási anyag minősége: győződjön meg arról, hogy a DNS-sablon tiszta, és nem égett le minden. Frissen feloldott nukleotidokkal és frissen felolvasztott enzimekkel is kiegészítheti, hogy maximalizálja a sikeres kísérlet esélyét.
Finomhangolási feltételek Minden enzim és nukleotidjaik jobban működnek bizonyos hőmérsékleten és pH-n a testben, valamint a Yaohai-féle Vörös fluoreszcens mRNS. Most módosítsa egy kicsit az árnyalatokat a feltételek között, amíg el nem éri az egyedi beállítás kulcsát.
A reverz transzkriptáz egy szokatlan enzim, mivel DNS-másolatot készít egy RNS-molekuláról. Mind a DNS-eket, mind a DNS-templátot (a cDNS-t) használtuk bemenetként az RNS előállítására szolgáló in vitro átírási módszerünkhöz. A legtöbb kísérletben azonban a tudósok a DNS-t RNS-vé akarják átírni. A fordított átírás az, ahol ugyanazt kapja a nevét, mint mRNS poli-A eloszlási vizsgálat a Yaohai készítette. Felbecsülhetetlen értékű eszköz a tudományban – a sejteken belüli RNS-molekulák tanulmányozásától kezdve a további kísérletekhez szükséges komplementer DNS-szálak előállításáig.
Valós életkísérletek, amelyekben az RNS az egyik leggyakrabban használt molekuláris eszköz, a Yaohai termékével együtt VLP vakcina előállítása E. coliban. Kvantitatív vizsgálatok: Ezek a tesztek feltárhatják a mintában lévő bármely specifikus molekula mennyiségét. A tudósok például szintetizálhatnak egy sejten belüli célzott génből származó RNS-kópiák in vitro transzkriptumkészítményét. A diagnosztika ezután meg tudja vizsgálni ezeket a másolatokat, ha vannak. Ha RNS-t keres, a diagnosztika lefuttat egy polimeráz láncreakciót (PCR), hogy a mintában amplifikálja ezeket a másolatokat. Ez lehetővé teszi a tudósok számára, hogy lássák, hogyan fejeződnek ki a gének a sejteken, sőt néhány rendkívül nagy áteresztőképességű vizsgálatot is lehetővé tesz, például bakteriális vagy vírusfertőzés jelenlétét, valamint genetikai rendellenességek diagnosztizálását.
Az in vitro Transcript Protocol vezető szerepet tölt be a mikrobiológiai biológiai CDMO-ban. Célunk a mikrobiálisan előállított vakcinák és terápiák voltak, amelyek alkalmasak az emberi, állatgyógyászati és háziállatok egészségügyi kezelésére. Rendelkezünk a legkorszerűbb RD platformokkal és gyártási technológiával, amely lefedi a teljes eljárást a mikrobiális törzsek fejlesztésétől és a sejtbankolástól kezdve a folyamat- és módszerfejlesztésig, a kereskedelmi és klinikai gyártásig, amely biztosítja az innovatív megoldások sikeres szállítását. Idővel hatalmas tudást halmoztunk fel a mikrobiális alapú biofeldolgozásról. Több mint 200 projektet zártunk le sikeresen, és segítünk ügyfeleinknek abban, hogy megfeleljenek az olyan előírásoknak, mint az amerikai FDA és az EU EMA előírásai. Segítünk nekik navigálni az Australia TGA-ban és a kínai NMPA-ban is. Szakértelmünk és széleskörű tapasztalatunk lehetővé teszi, hogy gyorsan reagáljunk a piaci igényekre, és testre szabott CDMO szolgáltatásokat nyújtsunk.
A Yaohai Bio-Pharma tapasztalattal rendelkezik az in vitro Transcript Protocol alapján létrehozott biológiai anyagok gyártásában. Személyre szabott RD és gyártási megoldásokat kínálunk, miközben ügyelünk arra, hogy nincsenek kockázatok. Különféle modalitásokban vettünk részt, mint például rekombináns alegység vakcinák, peptid hormonok, citokinek, növekedési faktorok, egydoménes antitest enzimek, plazmid DNS MRNS és még sok más. Számos mikroorganizmus specialistája vagyunk, beleértve az élesztő extracelluláris és intracelluláris szekrécióját (15 g/l hozamig), valamint a baktériumok intracellulárisan oldódó és zárványtestét (akár 10 g/l hozam). Létrehoztunk egy BSL-2 fermentációs platformot is bakteriális vakcinák létrehozására. A folyamatok javítására, a termékhozamok növelésére és a termelési költségek csökkentésére összpontosítunk. Egy erős technológiai csapat segítségével biztosíthatjuk a projektek gyors és megbízható lebonyolítását, amely gyorsabban hozza a piacra termékét.
A Yaohai Bio-Pharma, a biológiai termékek 10 legjobb gyártója, a mikrobiális fermentációra specializálódott. Modern létesítményt építettünk robusztus RD-képességekkel és fejlett berendezésekkel. Öt gyógyszergyártó sorunk van, amelyek megfelelnek a mikrobiális fermentáció és tisztítás GMP-követelményeinek. Két automatizált töltő-befejező sorunk is van patronokhoz, fiolákhoz és előretöltött fecskendőkhöz. A felhasználható fermentációs skálák az in vitro Transcript Protocoltól a 2000 literig terjednek. Az injekciós üveg töltésére vonatkozó előírások 1 ml-től 25 ml-ig terjednek. Az előretöltött fecskendő vagy patron töltési specifikációja körülbelül 1-3 ml. CGMP-kompatibilis gyártóüzemünk biztosítja a klinikai minták és a kereskedelmi cikkek folyamatos ellátását. Üzemünk nagy molekulákat állít elő, amelyeket a világra szállítanak.
A Yaohai BioPharma a 10 legjobb mikrobiális CDMO, amely magában foglalja az in vitro Transcript Protocolt, valamint a szabályozási ügyeket. Olyan minőségirányítási rendszerünk van, amely megfelel a jelenlegi GMP-szabványoknak és a globális előírásoknak. Szabályozási szakértőinkből álló csapatunk jártas a globális szabályozási keretrendszerekben, hogy felgyorsítsa a biológiai bevezetéseket. Nyomon követhető gyártási folyamatokat biztosítunk minőségi termékekről, valamint az USA FDA és EU EMA előírásainak betartásáról. Az ausztrál TGA és a kínai NMPA is elégedett. A Yaohai BioPharma sikeresen teljesítette az Európai Unió által minősített személy (QP) helyszíni auditját a GMP minőségbiztosítási rendszerünkre és a gyártóüzemünkre vonatkozóan. Ezen túlmenően elvégeztük az ISO9001 minőségirányítási rendszer, az ISO14001 környezetirányítási rendszer és az ISO45001 munkahelyi egészség- és biztonságirányítási rendszer első tanúsító auditjait.