Selon le dogme central, l’ARN messager (ARNm) est le pont permettant la transmission du matériel génétique de l’ADN aux protéines.
L'ARNm joue un rôle biologique en codant pour des protéines in vivo, et l'ARNm mature dans les organismes eucaryotes se compose de cinq composants : 5' Cap (structure de la coiffe), 5' UTR (région non codante), l'ORF (cadre de lecture ouvert), 3ʹ UTR. , et queue polyA 3' (queue polyadénylate).
Processus | Service en option | Détails du service | Délai de livraison (jour) |
Conception et optimisation de séquences d'ARNm | Conception et optimisation de séquences de codage | Alignement de séquence CDS Optimisation des codons CDS | 1 |
Conception et optimisation de séquences non codantes | Conception et optimisation de séquences UTR 5' Conception et optimisation de séquences UTR 3' Conception et optimisation de séquences polyA | 1-2 |
5'UTR/3'UTR |
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Queue PolyA 3' |
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Composants d'ARNm | Fonctions biologiques | Stratégies d'optimisation |
Casquette 5' | Protégez l'ARNm de la dégradation par les exonucléases et agissez de concert avec la queue polyA à l'extrémité 3', la protéine de liaison polyA et la protéine du facteur d'initiation de la traduction pour initier la traduction de la protéine. | La structure naturelle Cap1 évite les récepteurs de reconnaissance de formes et réduit ainsi la réponse immunitaire naturelle, qui peut être obtenue par un coiffage co-transcriptionnel en une étape ou un coiffage enzymatique en deux étapes [voir Coiffage enzymatique de l'ARNm et coiffage co-transcriptionnel pour plus de détails]. |
5'UTR | Le 5' UTR peut être reconnu par les ribosomes, réguler la traduction de l'ARNm et affecter la stabilité de l'ARNm. | Contient des séquences Kozak sans structure secondaire très stable. Les UTR naturels de gènes hautement exprimés sont préférés pour les ARNm de transcription in vitro (IVT) tels que l'α-globine et la β-globine. |
CDS | Régions codant pour des protéines et séquences codantes pour des antigènes, des anticorps ou d'autres protéines fonctionnelles. | L'optimisation des codons augmente le niveau de traduction, en notant que certains codons non optimaux peuvent jouer un rôle dans le repliement des protéines. |
3'UTR | Régule la traduction et la stabilité de l’ARNm. | Les UTR naturels de gènes hautement exprimés sont préférés pour les ARNm IVT tels que l'α-globine et la β-globine. |
Queue polyA de 3' | Régule l’expression des protéines et protège la structure de la coiffe de la dégradation. | Une longueur adéquate (100-150 pb) est requise ; le codage de la queue polyA sur le plasmide modèle de transcription garantit une longueur de queue polyA plus définie. |
Sources multiples de bibliothèques UTR naturelles et modifiées hautement exprimées ; stratégie de modification UTR mature ;
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Ajoutez des séquences polyA selon des modèles d’ADN pour contrôler plus précisément la longueur de l’ARNm.
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Conception de séquence d'un ARNm à double rapporteur : ARNm mCherry-eGFP
Le service d'ARNm de Yaohai Bio-Pharma continue d'être amélioré avec la conception et l'optimisation d'une séquence tandem de gènes doubles rapporteurs, qui permet la co-expression de gènes doubles.
À l'aide d'un réactif de transfection conventionnel, l'ARNm mCherry-eGFP à double séquence génique est transfecté dans des cellules 293T, et deux signaux fluorescents de mCherry (rouge) et de protéine fluorescente verte améliorée (eGFP) sont détectés avec une expression simultanée après 48 heures, et l'empilement le graphique est surligné en jaune.
Expression de l'ARNm de mCherry-eGFP dans une cellule 293T