Les produits obtenus par cyclisation in vitro et enrichissement en RNase R doivent être davantage retirés de la transcription in vitro (IVT), y compris les substrats non consommés dans la réaction de cyclisation, les sous-produits de réaction et l'ARN coupé.
Yaohai Bio-Pharma dispose d'une précipitation mature de LiCl, d'une purification par billes magnétiques, d'une purification auto-développée et d'autres solutions de purification diversifiées pour éliminer efficacement diverses impuretés et préparer des circARN hautement purs.
Solution de purification de petites quantités de circRNA pour la transfection cellulaire et dans le cadre d'expérimentations animales.
Solution de purification de petites quantités de circRNA pour la transfection cellulaire et dans le cadre d'expérimentations animales.
Scénarios d'application de meilleure qualité ;
Processus de purification stable et évolutif pour répondre aux exigences de production BPF.
Processus | Service en option | Détails du service | Délai de livraison (jour) | (produits) livrables |
purification de l'ARNcirc | Solution de purification conventionnelle | Précipitation du chlorure de lithium | 1 | substance médicamenteuse circARN |
Purification par billes magnétiques | ||||
Purification des circARN hautement purs | Chromatographie liquide préparative haute performance (HPLC) | 1-2 | ||
Échange de tampon | Ultrafiltration | 1 | ||
contrôle de qualité circRNA | Concentration/purification | Spectrophotométrie ultraviolette (UV) | 0.5 | Rapport d'essai |
Purity | Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)/E-gel | |||
HPLC en option | 1 |
Des scénarios d'application peuvent être réalisés.
ARNcirc avec une pureté supérieure à 90 % ;
Grâce à un contrôle strict des RNases dans l’environnement expérimental et des consommables, la dégradation de l’ARN est efficacement évitée.
Yaohai Bio-Pharma a mis au point une solution mature de purification des ARNcircN qui peut éliminer efficacement diverses impuretés liées au processus.
Les produits d'ARN circulaires purifiés par la solution conventionnelle sont toujours évidemment mélangés à de l'ARN coupé et des introns.
Après la solution de purification développée par Yaohai Bio-Pharma, diverses impuretés d'ARN linéaires, telles que l'ARN entaillé et les introns, peuvent être éliminées avec succès.
Validation de l'expression de l'ARNcirc
À l’aide d’un liposome conventionnel, le circARN eGFP purifié est transfecté dans des cellules 293T, et un signal de fluorescence est observé après 24 h et continue d’être amélioré après 48 h. Le signal de fluorescence est encore détecté le 7ème jour et le 14ème jour après la transfection.