Dans le processus de transcription in vitro (IVT) de l'ARNm, un ADN plasmidique linéarisé est nécessaire comme modèle de transcription IVT avec l'aide de la polymérase RNA T7. Un ADN plasmidique de haute qualité est crucial pour la transcription in vitro.
Sur la base de la plateforme de service mature de préparation de plasmides, Yaohai Bio-Pharma peut offrir un service de préparation d'ADN plasmidique linéarisé de haute pureté et de haut standard pour réaliser une transcription IVT efficace.
Détails des Services
| Process |
Service optionnel |
Détails du service |
Période de livraison (jour ouvrable) |
| Préparation de plasmides circulaires |
Synthèse de gènes |
Synthèse de gène (tierce partie) |
7-10 |
| Amplification de plasmide |
Amplification de plasmide |
2 |
| Extraction de plasmide |
| Préparation de plasmide linéarisé |
Linéarisation et purification des plasmides |
Linéarisation du plasmide |
1 |
| Purification de l'ADN linéarisé |
| Contrôle qualité de l'ADN de plasmide |
Concentration et pureté |
Spectrophotométrie Ultraviolette (UV) |
1-2 |
| Conformation du plasmide |
Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE) |
| Électrophorèse capillaire (CE) - Optionnel |
| Identification du plasmide |
Identification d'enzyme de restriction/AGE |
Nos fonctionnalités
- Modèle de Plasmide Freecut
Sélection flexible des méthodes de linéarisation
- Taux de récupération élevé
Optimisation des méthodes d'extraction et de purification d'ADN pour obtenir des taux de récupération élevés.
Normes strictes de contrôle des processus, avec un taux de conformation superhélicée des échantillons de plasmides de recherche supérieur à 80 %.
- Processus de Plateforme Mature
Services de préparation et de contrôle qualité de plasmides de haut niveau et haute efficacité pour répondre aux besoins expérimentaux.
Étude de cas
En prenant l'exemple du produit mRNA_luciferase du catalogue Yaohai Bio-Pharma, le plasmide modèle de transcription (niveau de recherche) présente un taux de superhélice supérieur à 90 %, un taux de linéarisation proche de 100 % et un rapport de transcription ultérieur pouvant atteindre 1:200 (ADN plasmidique linéarisé : ARN).
L'ARNm_luciferas obtenu par la préparation d'un plasmide linéarisé comme modèle est transfecté dans les cellules 293T, et l'activité de la réaction enzyme-sous-produit est évaluée 24 h après la transfection.
Un signal d'activité luciferas marqué peut être détecté, ce qui signifie que la protéine luciferas est exprimée efficacement, indiquant que la pureté du modèle de transcription peut pleinement satisfaire les exigences de la préparation d'ARNm de haute qualité.
Analyse du taux de plasmide supercoillé
Validation de l'expression de l'ARNm luciferas in vitro
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