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développement de plasmide ARNm

développement de plasmide ARNm

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développement de plasmide ARNm

ADN plasmidique, en tant que in vitro modèle de transcription in vitro (IVT), est un matériau brut important pour la fabrication d'ARNm. Un rendement élevé, une pureté élevée et une récupération élevée de l'ADN plasmidique sont les principaux objectif pendant le développement du processus plasmidique.

Yaohai Bio-Pharma offre une solution clé en main pour le développement de plasmides, y compris le développement des processus amont (fermentation), aval (purification), la caractérisation du procédé et la validation du procédé. Nous avons une vaste expérience dans l'amélioration du rendement des plasmides et leur isolement à partir de matrices complexes en développant et en optimisant les processus de fermentation, de purification et d'élimination des impuretés.

Détails du service

Le procédé biologique de base pour la fabrication de plasmides inclut : Escherichia coli (E. coli) fermentation, récolte cellulaire et lyse alcaline, clarification, concentration, processus en trois étapes de chromatographie (capture, purification intermédiaire et polissage), et concentration.

Détails du service Opérations unitaires Paramètres
E. coli fermentation
Flacon à secouer Compositions de milieu, antibiotique, volume d'inoculum, température de croissance, et etc.

Fermoir (7 L)

Antibiotique, volume d'inoculum, température de croissance, pH, oxygène dissous (OD), mode d'alimentation (par ex., par lots alimentés), milieux d'alimentation, temps de fermentation, et etc.

Récolte des cellules Microfiltration Standard E. coli processus de récolte
Lysis cellulaire Résuspension cellulaire, lyse alcaline, neutralisation Rapport d'alcalinité, temps de lyse
Clarification Filtration Filtration brute, 20 µm et un système de filtration de 5 µm (préféré)
Concentration Ultrafiltration, filtration à flux tangentiel Taille des pores (ou NMWC), pression transmembranaire (TMP), flux, rapport du volume de filtre à la surface de membrane
Chromatographie en trois étapes Chromatographie par exclusion stérique (SEC) ou chromatographie par filtration sur gel (GFC) Longueur et diamètre de la colonne, composition du tampon, volume d'injection, composition de la phase mobile (adsorption et désorption), pH, débit, conditions d'équilibration, de liaison, de lavage et d'élimination.
Chromatographie par affinité (AF)
Chromatographie par échange anionique (AEX)
Concentration Ultrafiltration, filtration à flux tangentiel Taille des pores (ou NMWC), pression transmembranaire (TMP), flux, rapport du volume de filtre à la surface de membrane
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