Le fondement de l'encapsulation est la conception et le développement du système de délivrance. Un système de délivrance bien conçu permet aux molécules de circRNA d'entrer dans l'organisme sans être dégradées par les enzymes ARN, puis d'être efficacement acheminées vers le site cible, de traverser la membrane cellulaire et de se libérer intracellulairement.
Les nanoparticules lipidiques (LNPs) sont le meilleur système de livraison disponible, avec des avantages en termes d'encapsulation, d'expression in vivo et de sécurité in vivo par rapport à d'autres systèmes de livraison. Les LNPs contenant des fragments d'acide nucléique sont facilement absorbés par les cellules et forment des corps intracellulaires. Une fois entré dans la cellule, l'environnement acide du corps intracellulaire provoque la protonation et la charge positive de la tête du lipide ionisé, ce qui fusionne avec la membrane interne du corps intracellulaire et libère l'acide nucléique cible dans la cellule pour agir.
Le service circRNA de Yaohai Bio-Pharma continue de s'améliorer et peut fournir un service d'encapsulation circRNA-LNP pour optimiser les paramètres critiques du processus et améliorer la cohérence et la reproductibilité de la production de médicaments circRNA.
Process | Détails du service | Période de livraison (Jour) | Livraisons |
encapsulation circRNA-LNP | Prétraitement des matériaux et liquides | 2 | produit pharmaceutique circRNA-LNP (DP) |
Mélange par dispositif microfluidique | |||
Filtration par flux tangentiel | 1 | ||
Filtration stérilisante | |||
contrôle qualité circRNA-LNP | Efficacité d'encapsulation | 1 | Rapport d'essai |
Taille des particules et indice de polydispersion | |||
Potentiel Zêta |
Synthèse rapide, efficacité R&D élevée et solutions pré-optimisées;
Le taux d'encapsulation peut atteindre plus de 90 %;
La taille des nanoparticules lipidiques peut être contrôlée en modifiant le taux et le ratio d'injection du fluide ;
les produits circRNA-LNP sont validés par une expression cellulaire in vitro et peuvent exprimer la protéine cible de manière efficace.
Des échantillons de LNP-eGFP circRNA sont préparés et différentes doses d'entre eux (1 µg, 2 µg et 4 µg) sont transfectées directement dans les cellules 293T pour vérifier s'ils peuvent exprimer la protéine cible. Après 48 heures de transfection, un signal fluorescent clair peut être observé, et il existe un effet dose-dépendant sur l'intensité de la fluorescence.
Le Lipo-circ_eGFP, constitué de liposome et de circRNA eGFP non encapsulé, est utilisé comme contrôle.