Les produits obtenus par cyclisation in vitro et l'enrichissement par RNase R nécessitent une élimination supplémentaire de la transcription in vitro (IVT), y compris les substrats non consommés dans la réaction de cyclisation, les sous-produits de réaction et l'ARN nické.
Yaohai Bio-Pharma dispose de solutions de purification diversifiées matures telles que la précipitation au LiCl, la purification par perles magnétiques, et des méthodes de purification auto-développées pour éliminer efficacement diverses impuretés et préparer un circRNA hautement purifié.
Solution de purification pour de petites quantités de circRNA destinées à la transfection cellulaire et comme partie des expériences animales.
Solution de purification pour de petites quantités de circRNA destinées à la transfection cellulaire et comme partie des expériences animales.
Scénarios d'application nécessitant une qualité supérieure ;
Processus de purification stable et évolutif pour répondre aux exigences de production GMP.
Process | Service optionnel | Détails du service | Période de livraison (Jour) | Livraisons |
purification circRNA | Solution de purification conventionnelle | Précipitation au chlorure de lithium | 1 | substance pharmaceutique circRNA |
Purification par boules magnétiques | ||||
Purification très pure de l'ARN circulaire | Chromatographie liquide à haute performance (HPLC) préparative | 1-2 | ||
Échange de tampon | Ultrafiltration | 1 | ||
contrôle qualité circRNA | Concentration \/ purifier | Spectrophotométrie Ultraviolette (UV) | 0.5 | Rapport d'essai |
Pureté | Électrophorèse sur gel d'agarose (AGE)/E-Gel | |||
HPLC - optionnel | 1 |
Les scénarios d'application peuvent être réalisés.
circRNA avec une pureté supérieure à 90 % ;
Grâce à un contrôle strict des RNases dans l'environnement expérimental et les consommables, la dégradation de l'ARN est efficacement prévenue.
Yaohai Bio-Pharma a mis en place une solution de purification circRNA mature qui peut éliminer efficacement divers impuretés liées au procédé.
Les produits d'ARN circulaire purifiés par la solution conventionnelle sont encore mélangés de manière évidente avec de l'ARN fragmenté et des introns.
Après avoir utilisé la solution de purification développée par Yaohai Bio-Pharma, diverses impuretés d'ARN linéaire, telles que l'ARN fragmenté et les introns, peuvent être retirées avec succès.
validation de l'expression circRNA
En utilisant un liposome conventionnel, le circRNA eGFP purifié est transfecté dans les cellules 293T, et un signal de fluorescence est observé après 24 h et continue de s'intensifier à 48 h. Le signal de fluorescence peut encore être détecté le 7ème jour et le 14ème jour après la transfection.