Jännitystekniikan merkitys
Kantatekniikan tavoitteena on tehdä ilmaisusta isäntä, jolla on odotukset, mikä on välttämätöntä biologisten CMC-kehitysten kannalta ja määrittää tuotteen ja valmistusprosessin laadun ja johdonmukaisuuden.
Avainsanat: kannan geenitekniikka ja seulonta, proteiinien ilmentymiskannan rakentaminen, mikrobisolujen muokkaus, bakteerikantatekniikka, hiivakantojen muokkaus, prokaryoottisten mikro-organismien rakentaminen, eukaryoottisten mikro-organismien muokkaus, muokattu kanta
Sovellus: ihmislääketiede, eläinlääketiede, rokote, synteettinen biologia, rekombinantti suurimolekyylinen biologia, biologinen reagenssi
Yaohai Bio-Pharman kantasuunnittelupalvelut
Hyödyntämällä yli 10 vuoden CDMO-kokemusta mikrobibiologiassa, olemme keränneet runsaasti kokemusta erityyppisten plasmidivektoreiden ja mikrobiisäntien (bakteerit, hiiva) suunnittelusta ja valinnasta. Voimme löytää parhaan ilmentämisjärjestelmän ainutlaatuisille biologeillesi.
Keräsimme erilaisia mikrobiisäntiä, joissa oli selkeät lähteet ja standardi CoA, mukaan lukien
Bakteerit: Escherichia coli (E. coli)
Hiiva: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Palvelun yksityiskohdat
|
Palvelut
|
Palvelun yksityiskohdat
|
Minimiaikajana/päivä
|
Tuotokset
|
|
Jännitystekniikka
|
Gene knock-out tai geenin poisto
|
TBD
|
Jännitystekniikan raportti
|
|
Gene knock-in eli geenin lisäys
|
|
Jänniterakenne (E. coli)
|
Plasmidin muunnos (useita isäntiä)
|
5
|
kaupallisten isäntien aitoustodistus,
Jännitysrakennusraportti
|
|
PCR-varmennus
|
|
Kantojen puhdistus
|
|
Kantojen säilytys
|
|
Kantarakenne (hiiva)
|
Pätevien hiivasolujen valmistaminen
|
10
|
|
Plasmidin linearisointi
|
|
Sähkömuunnos
|
|
Resistenssin/ravitsemuksellisen puutteen seulonta
|
|
Kantojen puhdistus
|
|
Kantojen säilytys
|
|
Sopiva isäntäseulonta
|
Plasmidin tai genomin DNA:n uuttaminen
|
15-20
|
Isännän seulontaprosessi,
Muokattujen kantojen testausraportti
|
|
PCR-todentaminen, restriktioentsyymidigestio
|
|
Kohdegeenin sekvensointi
|
|
Korkean ilmentymän isäntien seulonta
|
|
Geneettisesti stabiilien isäntien seulonta
|
|
Kantojen säilytys
|
Tapaustutkimus
Muokattu Hansenula polymorpha paransi HPV L1 VLP -ekspression saantoa.
Olemme perustaneet hiivan Hansenula polymorpha (H. polymorpha) rekombinanttiproteiinien/peptidien ilmentymisen suunnittelu- ja seulontaalusta. Ensinnäkin loimme H. polymorpha proteaasipuutoskannat kohdistetulla geenideleetiolla. Toiseksi HPV L1 -geenin sisältävä vektori transformoitiin kompetenttiin H. polymorpha solu. Lopuksi seulomme parhaan kloonin sadoista vaihtoehdoista, joilla on geneettisesti vakaus ja korkeat tuotantoominaisuudet.
Palvelumme ominaisuudet
Olemme osoittaneet asiantuntemusta erilaisista mikrobiisännistä, mm. Escherichia coli (E. coli) DH5a, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink-kanta 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) ja Hansenula polymorpha (H. polymorpha).
Meillä on kokemusta E. coli periplasminen eritys, liukoisen ja inkluusiokappaleen ilmentyminen sekä hiivan solunsisäinen tai eritysekspressio.
Emme lisää antibiootteja tai lisäämme antibiootteja viranomaisten ohjeiden mukaisesti.
Perustamme korkean suorituskyvyn seulontaalustan, jolla seulotaan tehokkaasti tuottavat ja vakaat kannat yli sadasta ehdokaskannasta.
Varmistamme, että kantojen suunnittelu- ja seulontaprosessi on jäljitettävissä Good Data and Record Management -osiossa.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
