Molekyylipainon määritys LC-MS:llä
Koskematon molekyylipaino on aina tunnustettu biologisten aineiden tärkeäksi ominaispiirteeksi. Intaktin molekyylipainon analyysiä käytetään proteiini-/peptidituotteiden osoittamiseen ja biologisten aineiden tarkistamiseen. Molekyylipainon mittaaminen on sääntelyohjeiden vaatimus.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa ehjän molekyylipainoanalyysin natiivissa, pelkistetyssä, N-deglykosyloidussa olosuhteissa. Käytämme nestekromatografia-massaspektrometriaa (LC-MS) koskemattoman molekyylipainon määrittämiseen.
Molekyylipainoa koskevat sääntelyvaatimukset
ICH Q6:ssa suositellaan, että "molekyylipaino (tai koko) määritetään käyttämällä kokoekskluusiokromatografiaa, SDS-polyakryyliamidigeelielektroforeesia (pelkistävissä ja ei-pelkistävissä olosuhteissa), massaspektrometriaa (MS) ja muita sopivia tekniikoita".
Analyyttiset metodit
| analyysi |
Menetelmät |
| Molekyylipaino |
LC-MS / nestekromatografia/sähkösumutusmassaspektrometria (LC/ES-MS) luonnollisille, pelkistetyille, N-deglykosyloituneille proteiineille tai alayksikölle |
Analyyttiset menettelyt
Ehjä molekyylipaino:
- Suoritetaan LC-MS alkuperäiselle näytteelle sellaisena kuin se vastaanotettiin.
- LC-MS Data-analyysi.
Alennettu molekyylipaino:
- Proteiininäytteen käsittely sopivalla pelkistimellä;
- LC-MS:n suorittaminen pelkistetylle proteiinille;
- LC-MS Data-analyysi.
N-deglykosyloitu molekyylipaino:
- N-glykaanien poistaminen sopivalla entsyymillä;
- Suoritetaan LC-MS N-deglykosyloidulle proteiinille;
- LC-MS Data-analyysi.
Alennettu ja N-deglykosyloitu molekyylipaino:
- Proteiininäytteen käsittely sopivalla pelkistimellä;
- N-glykaanien poistaminen sopivalla entsyymillä;
- LC-MS:n suorittaminen pelkistetylle ja N-deglykosyloidulle proteiinille;
- LC-MS Data-analyysi.
Proteiinialayksikön molekyylipaino:
- Alayksikön pilkkominen
- Suoritetaan LC-MS proteiinialayksiköllä
- LC-MS-dataanalyysi
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
EI
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
