Yaohai Bio-Pharma tarjoaa N-terminaalisen sekvenssin testaus- ja data-analyysipalveluita, jotka perustuvat nestekromatografia-massaspektrometriaan (LC-MS) tai Edman-hajoamismenetelmään, jonka avulla voit määrittää aminohapot kiinnostavan proteiinin vastaavissa päissä. N-terminaalinen modifikaatio voidaan myös analysoida LC-MS:llä.
Olemme olleet mukana erilaisten suurten molekyylien proteiinirakenteen karakterisoinnissa, mukaan lukien rekombinanttialayksikkörokotteet, nano-aineet/VHH:t/ yhden domeenin vasta-aineet (sdAb), vasta-ainefragmentit, hormonit/peptidit, sytokiinit, kasvutekijät (GF), entsyymit, jne.
N-terminaalien sekvenssin säännökset
ICH Q6B -ohjeiden mukaan on tarpeen vahvistaa proteiinisi sekvenssi ja tutkia päät mahdollisten variaatioiden varalta.
N Päätteiden sekvensointimenetelmät
analyysi |
Menetelmä |
N-terminaalinen sekvensointi |
Edman-hajoaminen, nestekromatografia-massaspektrometria (LC-MS) |
Menettelyt
LC-MS
1. Proteiinin N-terminaalinen fluoresoiva leimaus
2. Useat ruoansulatukset
3. LC-MS/massaspektrometria (MS) analyysi
Edmanin huononeminen
1. Sodium Dodecyl Sulfate (SDS) -geelielektroforeesi kohdeproteiinillesi
2. Siirrä geeli polyvinylideenifluoridi (PVDF) -kalvoille ja värjää
3. Tunnista ja leikkaa kohdeproteiinivyöhyke
4. N-pään Edman-sekvensointi
5. Tietojen analysointi