Kaikki kategoriat
Tunnisteettoman proteiinin valmistus

Tunnisteettoman proteiinin valmistus

Proteiiniketjut, jotka käytetään rekombinantitekniikoissa fuusiokumppaneina, mahdollistavat tehokkaan yhden vaiheen affinituspurificaation erilaisille proteiineille/tai peptideille eri ominaisuuksilla. Huolimatta tästä tärkeästä edusta, ketjut kuin ulkopuoliset amiinoasetyt voivat muuttaa proteiinin rakennetta ja biologisia toimintoja. Siksi tunnisteettomia (tag-free) proteiineja tai peptidejä suositaan enemmän turvallisuuden ja tehokkuuden varmistamiseksi, erityisesti biotehoaineiden alalla. Rekombinantiproteiinilla, jolla on fuusioketju, on rajoitetut mahdollisuudet saada lupaa lääkkeitä sertifioivilta virastoilta.

Perustuen mikrobiologisen kehitys- ja tutkimusplatformille, Yaohai Bio-Pharma tarjoaa mukautettuja palveluita tunnisteettomien (tag-free) proteiinien valmistukseen, joita on suunnattu tutkimuksen, kehityksen ja klinikkojen käyttöön liittyvien ainutlaatuisiin tavoitteisiin.

Avainsanat: tunnisteettomat proteiinituotanto, tunnistemattomien proteiinien puhdistus, tunnisteperustainen proteiinihaku, tunnisteettomat proteiinien ilmaisu ja puhdistus, korkeasti tunnisteettomat kohdeproteiinit

Käyttö: ihmislääketieteen tutkimus, eläinlääketieteen kehitys, rekombinanttirettien kehitys, rekombinanttisten suurten molekyylien biologisen tuotannon tuotanto

Mikrobitekninen R&D -alusta

Meillä on kokemusta mikrobijakoilman muokkaamisessa, fermointia koskevissa menetelmissä sekä tuotteen puhdistuksessa.

Bakteerit: Escherichia coli (E. coli)

Hiivät: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Mukautetut vaihtoehdot
Modaliteetti Rekombinantti proteiini
Aloitusmateriaalit Geenijonot, rekombinantit plasmidit tai muunnellut käytävät
Toimitteet Puhdistus: >80%, >85%, >90% Määrä: 0.2~10 g (määritetään projektin perusteella)
Lausekejärjestelmä ja muotoilu

E. coli periplaasinumisten julkaisu, ratkeava ja inklusiokappalelauseke;

Hiivien sisäinen tai julkaisulauseke

Analyysimenetelmät Ultraviolettisäteily (UV), biskiinihenttäysasayt (BCA), Bradford tai Lowry määrän määrittämiseksi
Natriumi-dodecyl-sulfatti-polyakryylaattigekalvoelektroforeesi (SDS-PAGE) puhdistustestaukseen
Valinnainen: Western blot (WB), enzym-yhteydet immunsorbonnanalyysi (ELISA), korkean suorituskyvyn nesteseparointi (HPLC)
Jäännössä olevat epäpuhdautet Endotoxini (valinnainen)
Palvelun yksityiskohdat

Palvelut

Palvelun yksityiskohdat

Pienin aikataulu (työpäivä)

Geeninsynteesi

Koodonin optimointi erityisen ilmaisuvirran kanssa

7 ~ 10 päivää

Geeninsynteesi

Plasmidin/vektorin rakentaminen

Kloonaus plasmidiin/vektoriin

2 päivää

Plasmidin transforaatior

Polymeraasiketjureaktio (PCR) vahvistus, rajoitusensiimihaaroittaminen, geenisekvenssi

3 päivää

Proteiinin esitys E. coli

Plasmidin transforaatiori,

2 päivää

Kasvatus häyrynkaklassissa

3 päivää

7L-asteinen fermintaatio, optimointi

4 päivää / erä

Tagittoman proteiinin puhdistus, optimointi

5~10 päivää / erä

Testaus sodiumpolyacrylaattigel-elektroforeesilla (SDS-PAGE)

Proteiinin esitys jeksiissä

Jeksiikompetenttien solujen valmistus

4 päivää

Plasmidin linearisointi ja elektro-transformaatio

7L-asteinen fermintaatio, optimointi

5 päivää

Tagittoman proteiinin puhdistus, optimointi

7 päivää / erä

Purettu proteiini ilman tagia

5~10 päivää / erä

QC SDS-PAGE:llä

Lisäpalvelut (valinnaiset)
Hanki Ilmainen Tarjous

Get in touch