Strain Engineeringin merkitys
Strain engineering pyrkii tekemään ilmaisujärjestelmän odotuksiin vastaaviksi ominaisuuksilla, mikä on välttämätöntä biologisten lääkkeiden CMC-kehityksessä ja määrittää tuotteen laadun sekä valmistusprosessin yhtenäisyyden.
Avainsanat: roduen geeniteknologia ja valinta, proteiinin ilmaisuroden rakentaminen, mikrobien solutekniikka, bakteeriroden rakentaminen, hiivien roden rakentaminen, prokaryoottisten mikrobioiden rakentaminen, eukaryoottisten mikrobioiden teknologia, muokattu rodu
Käyttötarkoitus: ihmislääkkeet, eläinlääkkeet, rokotukset, synteettinen biologia, rekombinoimat suuret molekyylit, biologiset reagentit
Yaohai Bio-Pharma:n strain engineering -palvelut
Hyödyntämällä yli 10 vuoden kokemusta mikrobisten biologien CDMO-toiminnassa olemme kertyttäneet runsaasti kokemusta erilaisten plasmidivektorien ja mikrobisten iskujen (bakteerit, hiivat) suunnittelusta ja valinnasta. Voimme löytää paras ilmaisujärjestelmän ainutlaatuisiin biologisiin tarpeisiisi.
Olemme keränneet erilaisia mikrobisia isäntöjä selkeällä lähteellä ja standardilla CoA:lla, mukaan lukien
Bakteerit: Escherichia coli (E. coli)
Hiivät: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)
Palvelun yksityiskohdat
Palvelut
|
Palvelun yksityiskohdat
|
Vähimmäisaika/päivä
|
Toimitteet
|
Sukupuun muokkaus
|
Geenin poisto tai geenin poistaminen
|
TBD
|
Lajin muokkausraportti
|
Geenin lisääminen, tai Geenin insertio
|
Lajin rakentaminen ( E. coli )
|
Plasmidin transforormaatio (moni-isännöissä)
|
5
|
COA kaupallisten isäntien suhteen,
Lajin rakennusraportti
|
PCR-verifikaatio
|
Sukupuhtauden puhdistus
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
Sukupuun rakentaminen (hiivalevy)
|
Kuntoisten hiivalevyjen solujen valmistus
|
10
|
Plasmidin linearisointi
|
Elektrotransformaatio
|
Vastus/Nutrienttivajeiden testaus
|
Sukupuhtauden puhdistus
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
Kelpaavan ison testaus
|
Plasmidi tai genomisen DNA:n extraktio
|
15-20
|
Isännän valintaprosessi,
Testiraportti muokatuista pitoisuuksista
|
PCR-verifikaatio, rajoitusensiymi-digeesointi
|
Kohdegeenin sekvensointi
|
Korkean ilmaisun isäntien valitseminen
|
Isäntien valitseminen geneettisesti vakaina
|
Sukupuhtauden säilyttäminen
|
Tapaustutkimus
Muokattu Hansenula polymorpha paransi HPV L1 VLP:n tuotantokapasiteettia.
Olemme perustaneet hiivien Hansenula polymorpha (H. polymorpha) muunneltujen proteiinien/petittien ilmaisemiseksi suunniteltuun kehitys- ja valintaplatformiin. Ensinnäkin luomme H. polymorpha proteasa-riippuvuuden poistamalla tiettyjä geenejä. Toiseksi, vektori, jossa on HPV L1 geeni, transformoidaan kompetenttiin H. polymorpha soluihin. Viimeisenä vaiheena valitsemme paras klooni sadista vaihtoehdoista, joka on sekä geneettisesti vakaa että korkean tuotannon omaava.

Palvelumme ominaisuudet
Olemme osoittaneet asiantuntemuksiamme eri mikrobisarjoissa, esimerkiksi Escherichia coli (E. coli) DH5α, TOP10, Trans10, BL21; Pichia pastoris (P. pastoris) SMD1168H, X-33, GS115, PichiaPink -ryhmä 1/2/3/4; Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae) ja Hansenula polymorpha (H. polymorpha) .
Olemme kokeneita E. coli periplaasmisen salpaamisessa, ratkeavassa ja inklusiokappaleiden ilmaisussa sekä hiivien sisäilmassa tai salpaamis ilmaisussa.
Emme käytä antibiooteja tai käytämme niitä sääntöjen mukaisesti.
Olemme perustaneet korkean läpimääräyksen alustan valita korkean tuotannon ja vakaiden pilkkujen valitsemiseksi yli sadasta ehdokaspilkkua.
Varmistamme, että muodon kehittämisen ja valinnan prosessi on jäljiteltävä hyvän datan ja tietueen hallinnan alaisena.