Molekyylipainon määritys LC-MS-menetelmällä
Kokonaismolekyylipaino on aina tunnustettu biologisten lääkkeiden tärkeänä ominaisuutena. Kokonaismolekyyliainnan analyysi käytetään osoittamaan proteiini/petee-tuotteita ja vahvistamaan biologisia lääkkeitä. Molekyyliainnan mittojen suorittaminen on vaatimus sääntelyviranomaisten ohjeissa.
Yaohai Bio-Pharma tarjoaa kokonaismolekyyliainnan analyysin alkuperäisissä, vähennetyissä ja N-deglykosoidituissa olosuhteissa. Käytämme nestesekvenssiyhtymämassaspectrometriaa (LC-MS) kokonaismolekyyliainnan määritykseen.
Sääntelyvaatimukset molekyyliainnalle
ICH Q6:ssa suositellaan, että ”molekyyliaino (tai koko) määrätään käyttämällä sulautumisesteistä kromatografiaa, SDS-polyakrylaattigelieletroforeesia (vähennyksissä ja ei-vähennyksissä), massaspectrometriaa (MS) ja muita sopivia tekniikoita”.
Analyttiset menetelmät
| Analyysi |
Menetelmät |
| Molekyylimassa |
LC-MS / Nestefyöriäinen kromatografia/Elektronspray-massaspektrometria (LC/ES-MS) alkuperäisistä, vähennetyistä, N-deglykosyloituista proteiineista tai sub-yksiköistä |
Analyysiprosessit
Kokonaismolekyylimassa:
- Suorittaa LC-MS alkuperäisestä otteesta saapuvana.
- LC-MS-tiedon analyysi.
Vähennetty molekyylimassa:
- Käsitellä proteiinioteketta sopivalla vähennyseaineella;
- Suorittaa LC-MS vähennettyyn proteiiniin;
- LC-MS-tiedon analyysi.
N-deglykosyloitu molekyylimassa:
- Poistaa N-glykanit sopivalla enzyymillä;
- Suorittaa LC-MS N-deglykosyloidulla proteiinilla;
- LC-MS-tiedon analyysi.
Redusoitu ja N-deglykosyloitu molekyylipaino:
- Käsitellä proteiinioteketta sopivalla vähennyseaineella;
- Poistaa N-glykanit sopivalla enzyymillä;
- Suorittaa LC-MS redusoitua ja N-deglykosyloitua proteiinia;
- LC-MS-tiedon analyysi.
Proteiinin alamolekyyliainepaino:
- Alamolekyyliaineen hajottaminen
- Suorittaa LC-MS proteiinin alamolekyyliaineella
- LC-MS -tiedon analyysi
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
