N-glykanien profiilointi on välttämätöntä biolääkkeiden tuotannossa. Yaohai Bio-Pharma tarjoaa N-glykani-profiilointipalvelun käyttämällä vapautettuja ja merkittyjä glykaneja Liquid Chromatography-Mass Spectrometry (LC-MS) -menetelmällä. N-glykanien näytteen valmistuksen yleiset vaiheet sisältävät glykoproteiinin (GP) hajoamisen, de-glykosyloinnin, puhdistuksen, merkitsemisen/derivoidumisen ja Solid Phase Extraction (SPE).
Olemme olleet mukana erilaisten suurten molekyylien proteiinirakenteen karakterisoinnissa, mukaan lukien rekombinantit alijakot rokotteet, Nanokroppien/VHHt/Single-domain Antibodies (sdAbs), Antibody Fragments, Hormonit/Peptidit, Sytokiinit, Kasvuhormonit (GF), Enzymit, Kollagenaat jne.
Säädölliset vaatimukset N-glykani-profiiloinnille
ICH Q6B -ohjeen mukaan, "glykoproteineille sokeripitoisuus (neutraalit sokerit, aminisokerit ja sialihappo) määrätään. Lisäksi sokeriketjujen rakenne, oligosakkaridimustepiirros (antennaprofiili) ja polypeptidiaineketjun glykosylointipaikat analysoituu niin pitkälle kuin mahdollista.
Analyyttinen menetelmä
| Analyysi |
Menetelmät |
| N-glykaani-profiili |
Vapautettujen ja merkittyjen glykanien nestespektrometrian (LC-MS) analyysi |
Menettelyt
1. Enzyymillä tapahtuva glykani vapauttaminen Peptide N-Glycosidase F:llä (PNGase F)
2. Vapautettujen glykanien derivatisointi 2-aminobensamidilla (2-AB)
3. Purettujen N-glykanien puhdistus TSK Amide - 80 -sarakkeella, jos on olemassa suuria määriä tehosekkeita, ei-volatileja saleja tai aineita, joissa on vapaata amiiniryhmää
4. Merkitseminen fluoresoivalla 2-aminobensamidilla (2-AB)
5. Merkittyjen N-glykanien LC-MS-analyysi
6. Mitä? Tietojen analysointi
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
