Glutamiini- ja asparagiini sivuketjut deamidaatio on yleinen muunnos vaikutuksiltaan proteiinibiopäästöjen ominaisuuksiin. Deamidaatio voi tapahtua myös glutamiiniresiideissä, mutta yleensä paljon hitaammin. Deamidaatioiden nopeudet vaikuttavat lämpötilasta, pH:sta, paikallisen proteiinirakenteesta ja viereisistä aminohapporesiideista.
Yaohai BioPharma tarjoaa aminohappo-deamidaatiotestauspalvelun, joka mahdollistaa sinun havaita aminohappo-deamidaation likvidekromatografia-massaspektrometria (LC-MS) -menetelmällä.
Olemme olleet mukana erilaisten suurten molekyylien proteiinirakenneratkaisemisessa, mukaan lukien rekombinoituja subyunitroineita rokotteita, nanokroppia/VHHjä/singledomain-antikeijoja (sdAbs), antikeijan fragmentteja, hormoneja/peptideja, sytokiineja, kasvuhormoneja (CF), enzyymejä, kollageneja jne.
Säädölliset vaatimukset aminohappo-deamidaatiolle
ICH Q6B -ohjeiden mukaan deamidoidut muodot voidaan havaita ja karakterisoida kromatografisilla, elektroforeettisilla ja/ta muilla relevantteilla analyysimenetelmillä.
Analyttiset menetelmät
| Analyysi |
Menetelmät |
| Deamidointi |
Virtauskromatografia-massaspektrometria (LC-MS) |
Menettelyt
esim., aspartaatti-deamidointi
1. Enzyyminen hajottaminen
2. LC-MS Korkean suorituskyvyn virtauskromatografia (HPLC) -oloissa
3. Data-analyysi
Asparagiini-deamidointi tapahtuu sukcinimidivälitulteen (Suc) kautta, joka on herkkä rasemointille ja hydrolysointille, tuottamalla neljä Asp isomeeria, mukaan lukien L-Asp, L-IsoAsp, D-Asp ja D-IsoAsp.
Teoreettisesti Gln-deamidointi voisi tuottaa neljä vastaavaa Glu-isomeeria prosessissa, joka on samankaltainen kuin Asn-deamidointi.
Korkean resoluution massaspektrometria tunnistaa helposti 1-Da massa-eroa Asn/Gln-sisältävien peptiidien ja niiden vastaavien deamidoidunut Asp/Glu-peitteisiin.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
