Plazmidová DNA, as in vitro transkripční (IVT) templát, je důležitou surovinou pro výrobu mRNA. Hlavní je vysoký výtěžek, vysoká purifikace a vysoká výtěžnost plazmidové DNA cíl během vývoje plazmidového procesu.
Yaohai Bio-Pharma poskytuje komplexní řešení pro vývoj plasmidů, včetně upstream (fermentace), downstream (purifikace) vývoje procesu a charakterizace procesu a validace procesu. Máme rozsáhlé zkušenosti se zlepšováním výtěžku plazmidu a jeho izolací z komplexních matric vývojem a optimalizací fermentačních, purifikačních a odstraňování nečistot.
Základní bioproces pro výrobu plazmidů zahrnuje: Escherichia coli (E. coli) fermentace, sklizeň buněk a alkalická lýza, čiření, koncentrace, třístupňový chromatografický proces (záchyt, mezičištění a leštění) a koncentrace.
Podrobnosti služby | Operace jednotky | parametry |
E. coli kvašení |
Baňkou protřepejte | Složení média, antibiotikum, objem inokula, teplota růstu atd. |
Fermentor (7 l) |
Antibiotikum, objem inokula, růstová teplota, pH, rozpuštěný kyslík (DO), režim krmení (např. vsázkové), krmné médium, doba fermentace atd. |
|
Sklizeň buněk | Mikrofiltrace | Standard E. coli proces sklizně |
Buněčná lýza | Resuspendování buněk, alkalická lýza, neutralizace | Poměr alkálií, doba lýzy |
Objasnění | filtrace | Surová filtrace, 20 µm a 5 µm filtrační řada (preferováno) |
Koncentrace | Ultrafiltrace, filtrace s tangenciálním tokem | Velikost pórů (nebo NMWC), transmembránový tlak (TMP), tok, poměr objemu filtrátu k ploše membrány |
Třístupňová chromatografie | Vylučovací chromatografie (SEC) nebo gelová filtrační chromatografie (GFC) | Délka a průměr kolony, složení pufru, injekční objem, složení mobilní fáze (adsorpce a desorpce), pH, průtok, ekvilibrace, vazebné, promývací a eluční podmínky. |
Afinitní chromatografie (AF) | ||
Aniontoměničová chromatografie (AEX) | ||
Koncentrace | Ultrafiltrace, filtrace s tangenciálním tokem | Velikost pórů (nebo NMWC), transmembránový tlak (TMP), tok, poměr objemu filtrátu k ploše membrány |
Další řešení procesu čištění biologických látek |