Dobrý den. Přemýšleli jste někdy, jak vědci mohou klonovat RNA? RNA je tato speciální molekula, kterou najdeme v našich buňkách a která dělá spoustu věcí, aby vytvořila proteiny, a proteiny jsou zde, takže naše tělo může dělat všechny správné věci. V tomto pokračování si projdeme mnohem zajímavější protokol používaný výzkumníky: In vitro transkript. A to vše znamená, že vědci berou RNA a dělají z ní hodně ve zkumavce (což je tato malá nádobka, kterou laboratoře používají), takže se zde pusťte do každého kroku.
Když jsem dokončil svůj předchozí příspěvek, uvědomil jsem si, že ten poslední mohl být trochu suchý - pojďte se připojit k zábavě v mokré laboratoři; takže, v souladu s formou, teď, když jste v pořádku a skutečně na zábavném (sic RNA) vlaku: Jaká činidla ac budete potřebovat pro váš EF? Abychom toho dosáhli, budeme potřebovat speciální proteiny zvané enzymy, identické s produktem Yaohai Rekombinantní výroba midkinů. Katalyzuje chemické reakce, tyto enzymy pomáhají při rozkladu. Takže teď potřebujeme jen náš kousek DNA. Tato funkce je DNA, kterou používáme jako templát pro kopírování pro naši RNA. Další regulační sekvence v RNA, jmenovitě nukleotidy, jsou také potřebné. Tyto nukleotidy jsou jako malé stavební bloky, které je třeba sestavit, aby se vytvořila RNA. Používáme také krátké trubičky malého průměru, abychom hodnocení chuti přenesli do jiného. Nakonec potřebujeme stroj (termocykler), který zajistí, aby naše reakce měly správnou teplotu. Kromě toho můžeme pro určité experimenty vyžadovat několik nástrojů a produktů.
Takže tady se věci rozcházejí, máme jeden řetězec RNA a nyní bychom chtěli mít více jeho kopií, také Výroba konjugovaných VLP vakcín vyvinutý Yaohai. Způsob, jak dosáhnout použití jiného enzymu; T7 RNA polymeráza. Tento unikátní enzym například rozpoznává specifické oblasti v RNA. skokový kužel pro vytváření mnohem více kopií RNA v řízení. V tomto okamžiku bude k vláknu RNA přidáno více pomocí T7 RNA polymerázy, dokud nebude vytvořena masa transkriptu, nebo dokud jí neřekneme, aby přestala.
Poté, co jsme co nejvíce izolovali RNA, přejděte dále dolů, abyste viděli, jak vyčistit a uložit RNA pro budoucí použití. Rhoades: Některé z těchto metod jsou z hlediska izolace RNA trochu extrémnější – ne vždy byste to použili, ale někdy je to pro určité typy experimentů potřeba. Jakmile je naše RNA zbavena jakýchkoli kontaminantů, může být skladována zmrazená. Takto je to bezpečné a můžeme to později použít v různých experimentech.
Kvalita výchozího materiálu: ujistěte se, že vaše šablona dna je čistá a není celá spálená. Můžete také doplnit čerstvě rekonstituované nukleotidy a nově rozmražené enzymy, abyste maximalizovali šance na úspěšný experiment.
Podmínky jemného doladění Všechny enzymy a jejich nukleotidy fungují lépe při specifické teplotě a pH uvnitř vašeho těla, stejně jako Yaohai's Červená fluorescenční mRNA. Nyní trochu upravte nuance mezi podmínkami, dokud se nedostanete tam, kde je klíč pro vaše jedinečné nastavení.
Reverzní transkriptáza je neobvyklý enzym, protože vytváří kopii DNA z molekuly RNA. Použili jsme jak DNA, tak templát DNA (cDNA) jako vstup pro naši metodu in vitro transkriptu pro generování RNA. Ve většině experimentů by však vědci chtěli přepsat DNA na RNA. Reverzní transkripce je místo, kde dostane své jméno stejné jako Testování distribuce mRNA poly-A vyrobeno společností Yaohai. Je to neocenitelný nástroj napříč vědou – od studia molekul RNA uvnitř buněk až po produkci komplementárních řetězců DNA pro další experimenty.
Experimenty v reálném životě, ve kterých je RNA spolu s produktem Yaohai jedním z nejčastěji používaných molekulárních nástrojů Výroba VLP vakcíny v E. coli. Kvantitativní testy: Tyto testy mohou odhalit množství jakékoli specifické molekuly přítomné ve vzorku. Vědci mohou například syntetizovat in vitro transkriptový přípravek kopií RNA odvozených z cíleného genu umístěného v buňce. Diagnostika pak může tyto kopie testovat v případě, že jsou. Při hledání RNA může diagnostika spustit polymerázovou řetězovou reakci (PCR) k amplifikaci těchto kopií ve vzorku. To umožňuje vědcům vidět, jak jsou geny exprimovány na buňkách, a dokonce umožňuje některé extrémně výkonné testy, jako je přítomnost bakteriální nebo virové infekce, a diagnostikovat genetické poruchy.
in vitro Transscript Protocol je přední v oblasti mikrobiálních biologických CDMO. Zaměřujeme se na mikrobiálně vyrobené vakcíny a terapeutika, která jsou vhodná pro péči o zdraví lidí, veterinářů i zvířat. Máme nejmodernější RD platformy a výrobní technologie, které pokrývají celý postup počínaje vývojem mikrobiálních kmenů a buněčného bankovnictví, přes vývoj procesů a metod až po komerční a klinickou výrobu, která zajišťuje úspěšné dodání inovativních řešení. Postupem času jsme nashromáždili rozsáhlé znalosti o mikrobiálním biologickém zpracování. Bylo úspěšně dokončeno více než 200 projektů a my pomáháme našim klientům dodržovat předpisy, jako jsou předpisy US FDA a EU EMA. Pomáháme jim také orientovat se v Austrálii TGA a Číně NMPA. Naše odborné znalosti a rozsáhlé zkušenosti nám umožňují rychle reagovat na požadavky trhu a poskytovat služby CDMO na míru.
Yaohai Bio-Pharma má zkušenosti s výrobou biologických přípravků vytvořených na základě protokolu transkriptu in vitro. Nabízíme přizpůsobená řešení RD a výroby, přičemž se ujišťujeme, že neexistují žádná rizika. Podíleli jsme se na různých modalitách, jako jsou rekombinantní podjednotkové vakcíny, peptidové hormony, cytokiny, růstové faktory, enzymy s jednodoménovými protilátkami, plazmidová DNA MRNA a mnoho dalších. Jsme specialistou na mnoho mikroorganismů, včetně kvasinkové extracelulární a intracelulární sekrece (výtěžky až 15g/l) a také na bakterie intracelulárně rozpustná a inkluzní tělíska (výtěžky až 10g/l). Vytvořili jsme také fermentační platformu BSL-2 pro vytvoření bakteriálních vakcín. Zaměřujeme se na zlepšování procesů, zvyšování výtěžnosti produktů a snižování výrobních nákladů. S využitím silného technologického týmu můžeme zajistit rychlé a spolehlivé dodání projektu, který uvede váš produkt na trh rychleji.
Yaohai Bio-Pharma, top 10 výrobců biologických produktů, se specializuje na mikrobiální fermentaci. Vybudovali jsme moderní zařízení s robustními schopnostmi RD a pokročilým vybavením. Máme pět výrobních linek léčivých látek, které splňují požadavky GMP pro mikrobiální fermentaci a čištění. Máme také dvě automatizované linky pro plnění-finiš pro zásobníky, lahvičky a předplněné injekční stříkačky. Fermentační škály dostupné pro použití se pohybují od protokolu in vitro transkriptu do 2000 1. Specifikace pro plnění lahvičky se pohybují od 25 ml do 1 ml. Specifikace plnění předplněné stříkačky nebo kazety se pohybují přibližně od 3 do XNUMX ml. Naše výrobní zařízení v souladu s cGMP zajišťuje stálé dodávky klinických vzorků i komerčních položek. Náš závod produkuje velké molekuly, které jsou expedovány do celého světa.
Yaohai BioPharma je Top 10 mikrobiálních CDMO, které zahrnuje protokol přepisu in vitro a také regulační záležitosti. Máme systém managementu kvality, který je v souladu se současnými normami GMP i globálními předpisy. Náš tým regulačních expertů je zběhlý v globálních regulačních rámcích pro urychlení biologických startů. Zajišťujeme sledovatelnost výrobních procesů kvalitních produktů, stejně jako dodržování pravidel US FDA a EU EMA. Spokojené jsou také Austrálie TGA a China NMPA. Společnost Yaohai BioPharma úspěšně prošla auditem kvalifikované osoby Evropské unie (QP) pro náš systém kvality GMP a také naše výrobní zařízení. Dále jsme absolvovali první certifikační audity systému managementu kvality ISO9001, systému environmentálního managementu ISO14001 a systému managementu bezpečnosti a ochrany zdraví při práci ISO45001.