Прывітанне. Вы калі-небудзь задумваліся, як навукоўцы могуць кланаваць РНК? РНК - гэта спецыяльная малекула, якую мы знаходзім у нашых клетках, якая выконвае мноства дзеянняў для стварэння бялкоў, а вавёркі існуюць, каб наша цела магло выконваць усе неабходныя рэчы. У гэтай частцы мы азнаёмімся з значна больш цікавым пратаколам, які выкарыстоўваецца даследчыкамі: стэнаграмай in vitro. І ўсё гэта азначае, што навукоўцы бяруць РНК і вырабляюць яе шмат у прабірцы (якая і выкарыстоўваецца ў лабараторыях з гэтай маленькай слоічкай), так што давайце разбярэмся з кожным этапам.
Скончыўшы сваю папярэднюю публікацыю, я зразумеў, што апошняя, магчыма, была крыху сухой, каб далучыцца да весялосці ў вільготнай лабараторыі; такім чынам, у адпаведнасці з формай цяпер, калі вы добра і сапраўды на вясёлым цягніку (таксама па стварэнні РНК): якія рэагенты і г.д. спатрэбяцца для вашага EF?? Каб дасягнуць гэтага, нам спатрэбяцца спецыяльныя вавёркі, якія называюцца ферментамі, ідэнтычныя прадукту Yaohai Рэкамбінантныя Midkine Manufacturing. Ён каталізуе хімічныя рэакцыі, гэтыя ферменты дапамагаюць у расшчапленні. Такім чынам, цяпер нам патрэбна толькі наша частка ДНК. Гэта функцыя ДНК, якую мы выкарыстоўваем у якасці шаблону для капіявання нашай РНК. Неабходныя таксама дадатковыя рэгулятарныя паслядоўнасці ў РНК, а менавіта нуклеатыдаў. Гэтыя нуклеатыды падобныя на малюсенькія будаўнічыя блокі, якія трэба сабраць, каб зрабіць РНК. Мы таксама выкарыстоўваем кароткія трубкі невялікага дыяметра, каб змясціць смакавую ацэнку ў іншыя. Нарэшце, нам патрэбна машына (тэрмацыклер), якая гарантуе, што нашы рэакцыі знаходзяцца пры патрэбнай тэмпературы. Акрамя таго, нам можа спатрэбіцца некалькі інструментаў і прадуктаў для пэўных эксперыментаў.
Такім чынам, тут усё разыходзіцца, у нас ёсць адзін ланцуг РНК, і цяпер мы хочам мець больш яго копій, а таксама Вытворчасць кан'югаваных вакцын VLP распрацаваны Yaohai. Спосаб дасягнення выкарыстання іншага фермента; Т7 РНК-полимераза. Гэты унікальны фермент, напрыклад, распазнае пэўныя ўчасткі РНК. скачучы конус для стварэння значна большай колькасці копій РНК у працэсе. У гэты момант РНК-палімераза Т7 да ланцуга РНК будзе дадаваць больш, пакуль не будзе створана маса стэнаграмы або пакуль мы не скажам ёй спыніцца.
Пасля таго, як мы максімальна вылучылі РНК, пракруціце ўніз, каб убачыць, як ачысціць і захаваць РНК для выкарыстання ў будучыні. Роудс: Некаторыя з гэтых метадаў крыху больш экстрэмальныя з пункту гледжання ізаляцыі РНК - вы не заўсёды выкарыстоўваеце гэта, але часам для пэўных тыпаў эксперыментаў гэта неабходна. Пасля таго, як наша РНК вызваліцца ад забруджванняў, яе можна захоўваць у замарожаным выглядзе. Такім чынам, гэта бяспечна, і мы можам выкарыстоўваць яго пазней у розных эксперыментах.
Якасць зыходнага матэрыялу: пераканайцеся, што шаблон ДНК чысты і не ўвесь згарэў. Вы таксама можаце дадаць толькі што адноўленыя нуклеатыды і толькі што размарожаныя ферменты, каб павялічыць шанцы на паспяховы эксперымент.
Умовы дакладнай налады. Усе ферменты і іх нуклеатыды працуюць лепш пры пэўнай тэмпературы і рн ўнутры вашага цела, а таксама Яохай Чырвоная флуарэсцэнтная мРНК. Цяпер трохі змяняйце нюансы паміж умовамі, пакуль не дойдзеце да таго, дзе знаходзіцца ключ да вашай унікальнай налады.
Зваротная транскрыптаза - незвычайны фермент, так як ён робіць копію ДНК з малекулы РНК. Мы выкарыстоўвалі як ДНК, так і шаблон ДНК (кДНК) у якасці ўваходных дадзеных для нашага метаду расшыфроўкі in vitro для атрымання РНК. Аднак у большасці эксперыментаў навукоўцы хацелі б транскрыбаваць ДНК у РНК. Зваротная транскрыпцыя - гэта тое ж самае, што і назва Тэставанне размеркавання мРНК полі-А зроблена Yaohai. Гэта неацэнны інструмент для ўсёй навукі - ад вывучэння малекул РНК унутры клетак да атрымання камплементарных ланцугоў ДНК для далейшых эксперыментаў.
Эксперыменты ў рэальным жыцці, у якіх РНК з'яўляецца адным з найбольш часта выкарыстоўваных малекулярных інструментаў, нароўні з прадуктам Yaohai Вытворчасць вакцыны VLP супраць кішачнай палачкі. Колькасныя аналізы: Гэтыя тэсты могуць выявіць колькасць любой канкрэтнай малекулы, якая прысутнічае ва ўзоры. Напрыклад, навукоўцы могуць сінтэзаваць in vitro падрыхтоўку стэнаграмы копій РНК, атрыманых з мэтавага гена, размешчанага ў клетцы. Дыягностыка можа затым правесці аналіз гэтых копій, калі яны ёсць. шукаючы РНК, дыягностыка можа запусціць палімеразную ланцуговую рэакцыю (ПЦР), каб павялічыць гэтыя копіі ў якасці ўзоры. Гэта дае навукоўцам магчымасць убачыць, як гены экспрэсіруюцца ў клетках, і нават дазваляе правесці некаторыя надзвычай высокапрадукцыйныя аналізы, напрыклад, наяўнасць бактэрыяльнай або віруснай інфекцыі, і дыягнаставаць генетычныя парушэнні.
In vitro Transcript Protocol з'яўляецца вядучым у галіне мікробных біяпрэпаратаў CDMO. Наша ўвага была засяроджана на вакцынах і лячэбных прэпаратах, вырабленых з мікробаў, якія падыходзяць для аховы здароўя людзей, ветэрынарыі і хатніх жывёл. У нас ёсць самыя сучасныя платформы RD і тэхналогія вытворчасці, якія ахопліваюць усю працэдуру, пачынаючы з распрацоўкі мікробных штамаў і банка клетак, да распрацоўкі працэсаў і метадаў, да камерцыйнай і клінічнай вытворчасці, што забяспечвае паспяховую дастаўку інавацыйных рашэнняў. З цягам часу мы назапасілі велізарныя веды аб біяапрацоўцы на аснове мікробаў. Больш за 200 праектаў былі паспяхова завершаны, і мы дапамагаем нашым кліентам выконваць такія правілы, як FDA ЗША і EMA ЕС. Мы таксама дапамагаем ім арыентавацца ў Аўстраліі TGA і Кітаі NMPA. Наш прафесійны вопыт і вялікі вопыт дазваляюць нам хутка рэагаваць на патрабаванні рынку і прадастаўляць індывідуальныя паслугі CDMO.
Кампанія Yaohai Bio-Pharma мае вопыт вытворчасці біяпрэпаратаў, створаных на аснове пратаколу расшыфроўкі in vitro. Мы прапануем індывідуальныя RD і вытворчыя рашэнні, гарантуючы адсутнасць рызык. Мы ўдзельнічаем у розных метадах, такіх як рэкамбінантныя субадзінічныя вакцыны, пептыды, гармоны, цітокіны, фактары росту, аднадаменныя ферменты антыцелаў, плазмідная ДНК, МРНК і многае іншае. Мы спецыялізуемся на многіх мікраарганізмах, у тым ліку на пазаклеткавай і ўнутрыклеткавай сакрэцыі дрожджаў (ураджайнасць да 15 г/л), а таксама на ўнутрыклеткавых растваральных бактэрыях і цельцах уключэнняў (ураджайнасць дасягае 10 г/л). Мы таксама стварылі ферментацыйную платформу BSL-2 для стварэння бактэрыяльных вакцын. Мы засяроджваемся на паляпшэнні працэсаў, павышэнні выхаду прадукцыі і зніжэнні вытворчых выдаткаў. Выкарыстоўваючы моцную тэхналагічную каманду, мы можам забяспечыць хуткую і надзейную дастаўку праекта, што дазволіць хутчэй вывесці ваш прадукт на рынак.
Yaohai Bio-Pharma, 10 лепшых вытворцаў біялагічных прадуктаў, спецыялізуецца на мікробнай ферментацыі. Мы пабудавалі сучасны аб'ект з надзейнымі магчымасцямі RD і сучасным абсталяваннем. У нас ёсць пяць ліній па вытворчасці лекавых рэчываў, якія адпавядаюць патрабаванням GMP для мікробнай ферментацыі і ачысткі. У нас таксама ёсць дзве аўтаматызаваныя лініі напаўнення картрыджаў, флаконаў і папярэдне запоўненых шпрыцаў. Маштабы ферментацыі, даступныя для выкарыстання, вар'іруюцца ад пратакола расшыфроўкі in vitro да 2000 л. Спецыфікацыі для напаўнення флаконаў вар'іруюцца ад 1 мл да 25 мл. Спецыфікацыі напаўнення папярэдне напоўненага шпрыца або картрыджа вар'іруюцца ад прыблізна 1-3 мл. Наша сумяшчальная з цГМФ вытворчасць забяспечвае пастаянныя пастаўкі клінічных узораў, а таксама камерцыйных тавараў. Наш завод вырабляе вялікія малекулы, якія пастаўляюцца па ўсім свеце.
Yaohai BioPharma - гэта 10 лепшых мікробных CDMO, якія ўключаюць у сябе пратакол расшыфроўкі in vitro, а таксама нарматыўныя пытанні. У нас ёсць сістэма менеджменту якасці, якая адпавядае дзеючым стандартам GMP, а таксама сусветным правілам. Наша каманда экспертаў па нарматыўных правах валодае глабальнай нарматыўнай базай для паскарэння запуску біялагічных прадуктаў. Мы гарантуем прасочванне якасных вытворчых працэсаў, а таксама адпаведнасць правілам FDA ЗША і ЕС EMA. Аўстралія TGA і Кітай NMPA таксама задаволеныя. Yaohai BioPharma паспяхова прайшла аўдыт на месцы кваліфікаванага спецыяліста Еўрапейскага саюза (QP) для нашай сістэмы якасці GMP, а таксама нашага вытворчага аб'екта. Акрамя таго, мы прайшлі першыя сертыфікацыйныя аўдыты сістэмы менеджменту якасці ISO9001, сістэмы кіравання навакольным асяроддзем ISO14001 і сістэмы кіравання аховай здароўя і бяспекі ISO45001.