РНК люциферазы светлячка (F-Luc) вырашает белок люциферазы, якія спачатку была ізольвана з светлячка, Photinus pyralis. Гэты белок выдадaje біалумінэсць у наяўнасці субстрата, люцыферыну.
РНК люциферазы светляка звычайна выкарыстоўваецца як пазітыўны кантроль пры трансфекцыі РНК і разработцы сістэмы даступу. Люцифераза светляка таксама можа выкарыстоўвацца ў культуре млекавітальных клетак для вымярэння абодвух генаў адлюстраванне і жыццяспасабнасці клетак.
Yaohai Bio-Pharma прасабляе неадпрацаваны ці з N1Ψ модыфікацыяй Firefly Luciferase mRNA , з структурай Cap1, аптымізаванымі кодонамі, інжынерным UTR і 110-нуклеатовым хвостам polyA, каб павялічыць стаякасць mRNA і эфектыўнасць перакладу.
Выrob
РНК люциферазы светляка, Cap1, poly(A) хвост, незменная ці зменшшая РНК
ДЭТАЛІ ПРЫЗНАЦКА
| Выrob |
Firefly Luciferase mRNA |
| Кат. Нум. |
mP003 |
| Змест RNA |
100 µг~10 мг (OD260) |
| Чыстасьць |
A260/A280 |
| Аднагароду і чыстата |
Электрафарэза ў агарасавай гелю (AGE) |
| 5’Капа |
Капа1 |
| 3’ poly(A) хвост |
110±5 нт |
| Мадыфікацыя баз |
Немадыфікаваны, N1Ψ |
| Буфер |
Вада без RNase (жыдкіść) |
| Адправка |
Дасылаць з сухім ледам; ці ў амбіентаўнай температуры |
| Храненне |
Рыдна, у або ніжэй -20°C; Ліофілізаваны порошак, у 4°C |
| Зastosаванне |
Репартарныя гены, пазітыўны кантроль |
Іншыя дапаможныя опцыі
| 5' Кап |
● Без капа
● Cap0, спалучанае капаванне
● Cap1, спалучанае капаванне
● Кап1, энзыматычнае капіруванне
|
| 5’ UTR\/3’ UTR |
● Паслядоўнасць UTR натуральнага паходжання
● Паслядоўнасць UTR мутанта\/інжынеравана
|
| 3' ПоліA хвост |
● хвост 100A ~120A (рэкамендавана)
● Сегмэнтаваны поліA хвост
● Іншы цягамы хвост
|
| Мадифікаваныя нуклеазы |
● Незмяненыя базы,
● Псевдуюрыцын (Ψ),
● N1-Метылпсевдуюрыцын (N1Ψ),
● 5-метылцытызін (m5C),
● 5-метылуюрыцын (m5U),
● 5-метаксуюрыцын (5moU),
● 2-тыйоюрыцын (s2U),
● 2′-O-метыл-U
● Іншыя
|
падготовка mRNA і выразка ў клеткі
Узяўшы лінейны пляzmідную ДНК (pDNA), якая мае F-Luc mRNA кодуючыя гены як шаблон IVT, мы атрымалі чыстыя транскрыпты F-Luc mRNA праз капсуванне і чыстку, з структурай cap1 і модыфікацыяй N1Ψ.
Чысты F-Luc mRNA (1 μg) былі сумесцены з комércальным рэагентам для трансфекцыі і трансфекаваны ў клеткі 293T у пластынцы 96-х скварападобных. Асай люціферазы быў праведзены праз 24 гадзіны.
Выразка мРНК Фарфала ў клетках 293T
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
