мРНК eGFP экспрэсіруе ўзмоцнены зялёны флуарэсцэнтны бялок (eGFP), першапачаткова атрыманы з медузы Aequorea victoria. eGFP паказвае ярка-зялёную флуарэсцэнцыю пры ўздзеянні святла ў дыяпазоне ад блакітнага да ўльтрафіялетавага, з пікам выпраменьвання пры 509 нм. мРНК eGFP звычайна выкарыстоўваецца ў якасці рэпарцёрнага маркера (станоўчага кантролю) пры трансфекцыі і распрацоўцы сістэмы дастаўкі.
Yaohai Bio-Pharma прапануе немадыфікаваную або мадыфікаваную N1Ψ мРНК eGFP са структурай Cap1, аптымізаванымі кадонамі, сканструяваным UTR і хвастом 110nt poly(A) для павышэння стабільнасці мРНК і эфектыўнасці трансляцыі.
прадукт
мРНК eGFP, Cap1, полі(А) хвост, немадыфікаваная або мадыфікаваная мРНК
больш падрабязна
| прадукт |
мРНК eGFP |
| Кот. Не |
mP001 |
| Змест РНК |
100 мкг~10 мг (OD260) |
| Чысціня |
A260 / A280 |
| Ідэнтыфікацыя і чысціня |
Электрафарэз у агарозным гелі (AGE) |
| 5'Cap |
Cap1 |
| 3' полі(А) хвост |
110±5 нт |
| Базавая мадыфікацыя |
Незменены, N1Ψ |
| Буфер |
Вада без РНКаз (вадкая) |
| адпраўка |
Карабель з сухім лёдам; або пры тэмпературы навакольнага асяроддзя |
| захоўванне |
Вадкасць, тэмпература -20°C або ніжэй; Лиофилизированный парашок, пры 4°C |
| дадатак |
Гены-рэпарцёры, станоўчы кантроль |
Іншыя наладжвальныя параметры
| 5' Кап |
● Без шапкі
● Cap0, са-кап
● Cap1, са-кап
● Cap1, ферментатыўнае кэпаванне
|
| 5' UTR/3' UTR |
● Паслядоўнасць UTR прыроды
● Паслядоўнасць UTR мутанта/спраектаванай
|
| 3' PolyA хвост |
● 100A ~120A Хвост (рэкамендуецца)
● Сегментаваны поліА хвост
● Іншы карыстацкі хвост
|
| Мадыфікаваныя нуклеазіды |
● Немадыфікаваныя базы,
● Псеўдаурыдын (Ψ),
● N1-метилпсевдоуридин (N1Ψ),
● 5-метилцитозин (m5C),
● 5-метилуридин (m5U),
● 5-метоксиуридин (5moU),
● 2-тыурыдын (s2U),
● 2'-O-пазначаў-U
● іншыя
|
Падрыхтоўка мРНК і клеткавая экспрэсія
Атрыманне лінеарызаванай плазміднай ДНК (пДНК). мРНК eGFP кадуючы гены ў якасці шаблону IVT, мы атрымалі чыстыя стэнаграмы мРНК eGFP шляхам сумеснага каўпачэння і ачысткі транскрыпцыі са структурай cap1 і мадыфікацыяй N1Ψ.
Чыстую мРНК eGFP (1 мкг), змешаную з камерцыйным рэагентам для трансфекцыі, трансфецыравалі ў клеткі 293T у 96-лункавым пласціне. Флуарэсцэнтная фатаграфія была праведзена праз 24 гадзіны.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
