Плазмідна ДНК, а пробірці матриця транскрипції (IVT), є важливою сировиною для виробництва мРНК. Високий вихід, висока ступінь очищення та високе відновлення плазмідної ДНК є основними мета під час розвитку плазмідного процесу.
Yaohai Bio-Pharma надає універсальне рішення для розробки плазмід, включаючи розробку процесів на початку (ферментація), розробку (очищення) процесів, характеристику процесу та валідацію процесу. Ми маємо великий досвід покращення виходу плазміди та виділення її зі складних матриць шляхом розробки та оптимізації процесів ферментації, очищення та видалення домішок.
Основний біопроцес для виробництва плазмід включає: Кишкова паличка (кишкова паличка) ферментація, збір клітин і лужний лізис, освітлення, концентрація, тристадійний процес хроматографії (захоплення, проміжне очищення та полірування) і концентрація.
Сервісні деталі | Операції підрозділу | параметри |
E. палички Бродіння |
Струсніть колбу | Склад середовищ, антибіотик, об’єм інокулята, температура росту тощо. |
Ферментор (7 л) |
Антибіотик, об’єм інокулята, температура росту, pH, розчинений кисень (DO), режим живлення (наприклад, періодичне підживлення), середовище живлення, час ферментації тощо. |
|
Збір клітин | Мікрофільтрація | стандарт E. палички процес збору врожаю |
Лізис клітин | Ресуспензія клітин, лужний лізис, нейтралізація | Лужне співвідношення, час лізису |
Прояснення | Фільтрація | Неочищена фільтрація, ланцюжок фільтрів 20 мкм і 5 мкм (бажано) |
Концентрація | Ультрафільтрація, тангенціальна фільтрація | Розмір пор (або NMWC), трансмембранний тиск (TMP), потік, співвідношення об'єму фільтрату до площі мембрани |
Тристадійна хроматографія | Ексклюзійна хроматографія (SEC) або гель-фільтраційна хроматографія (GFC) | Довжина та діаметр колонки, склад буфера, об’єм ін’єкції, склад рухомої фази (адсорбція та десорбція), рН, швидкість потоку, умови рівноваги, зв’язування, промивання та елюювання. |
Афінна хроматографія (AF) | ||
Аніонообмінна хроматографія (AEX) | ||
Концентрація | Ультрафільтрація, тангенціальна фільтрація | Розмір пор (або NMWC), трансмембранний тиск (TMP), потік, співвідношення об'єму фільтрату до площі мембрани |
Більше рішень для процесу очищення біологічних препаратів |