Plazmidová DNA, ako in vitro transkripčný (IVT) šablon je dôležitým surovcom pre výrobu mRNA. Vysoká výnosnosť, vysoká čistota a vysoká recirkulácia plazmidovej DNA je hlavná cieľ pri vývoji plazmidového procesu.
Yaohai Bio-Pharma ponúka kompletné riešenie pre vývoj plazmidov, vrátane horného prúdu (fermentácia), dolného prúdu (čistenie) procesy vývoja, charakterizácie procesu a overenia procesu. Máme rozsiahle skúsenosti s vylepšovaním výnosnosti plazmidu a jeho izoláciou z komplexných matic prostredníctvom vývoja a optimalizácie fermentačných, čistiacich a odstraňovacích procesov nápliev.
Základný bioproces na výrobu plazmidov obsahuje: Escherichia coli (E. coli) fermentácia, úbytok bunky a alkalická lišie, vyčistenie, koncentrácia, trojstupňový chromatografický proces (zachytenie, medzičistenie a dočistenie), a koncentrácia.
Podrobnosti služby | Jednotkové operácie | Parametre |
E. coli fermentácia |
Tremovací fláša | Súčasť média, antibiotikum, objem nasadenia, teplota rastu a iné. |
Fermentor (7 L) |
Antibiotikum, objem nasadenia, teplota rastu, pH, disolvovaný kyslík (DO), režim krmenia (napr. fed-batch), krmenie médiom, čas fermentácie a iné. |
|
Úbytok bunk | Mikrofiltrácia | Štandardná E. coli proces úbytku |
Lýza buniek | Znovupodmávka buniek, alkalická lýza, neutralizácia | Pomer alkáli, čas lýzy |
Průčistosť | Filtrácia | Hrubé filtrovanie, 20 µm afiltrovací sústav 5 µm (preferované) |
Koncentrácia | Ultrafiltračná filtračná membránna technológia, tangenciálny tok filtračnej membrány | Veľkosť porov (alebo NMWC), Transmembránny tlak (TMP), Flux, pomer objemu filtrátu k ploche membrány |
Trietapová chromatografia | Chromatografia podľa veľkosti (SEC) alebo gelová filtračná chromatografia (GFC) | Dĺžka a priemer stĺpca, súčin kompozície, objem vstrelky, kompozícia mobilnej fáze (adsorpcia a desorpcia), pH, rýchlosť prieteču, rovnováha, väzba, mytie a elučné podmienky. |
Afinitná chromatografia (AF) | ||
Kromatografia anionového výmeny (AEX) | ||
Koncentrácia | Ultrafiltračná filtračná membránna technológia, tangenciálny tok filtračnej membrány | Veľkosť porov (alebo NMWC), Transmembránny tlak (TMP), Flux, pomer objemu filtrátu k ploche membrány |
Viacej riešení procesu čistenia biologických látek |