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sviluppo di Plasmidi mRNA

sviluppo di Plasmidi mRNA

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sviluppo di Plasmidi mRNA

Plasmide DNA, come in vitro modello per la trascrizione in vitro (IVT), è un materiale grezzo importante per la produzione di mRNA. Alto rendimento, alta purificazione e alta recupero del plasmide DNA sono i principali fattori obiettivo durante lo sviluppo del processo del plasmide.

Yaohai Bio-Pharma offre una soluzione completa per lo sviluppo di plasmidi, inclusi processi upstream (fermentazione), downstream (purificazione), caratterizzazione del processo e validazione del processo. Abbiamo un'ampia esperienza nello migliorare il rendimento dei plasmidi ed isolandoli da matrici complesse attraverso lo sviluppo e l'ottimizzazione dei processi di fermentazione, purificazione e rimozione delle impurità.

Dettagli del servizio

Il processo biologico di base per la produzione di plasmidi include: Escherichia coli (E. coli) fermentazione, raccolta cellulare e lisi alcalina, chiarificazione, concentrazione, processo cromatografico a tre passaggi (cattura, purificazione intermedia e lucidatura) e concentrazione.

Dettagli del servizio Operazioni Unitarie Parametri
E. coli fermentazione
Flask per scuotimento Composizioni del mezzo, antibiotico, volume dell'inoculo, temperatura di crescita e altro.

Fermentatore (7 L)

Antibiotico, volume dell'inoculo, temperatura di crescita, pH, ossigeno disciolto (DO), modalità di alimentazione (es. batch con aggiunta continua), mezzi di alimentazione, tempo di fermentazione e altro.

Raccolta delle cellule Microfiltrazione Standard E. coli processo di raccolta
Lisi cellulare Risospensione cellulare, lisi alcalina, neutralizzazione Rapporto di alcalinità, tempo di lisi
Chiarificazione Filtrazione Filtrazione grezza, 20 µm e un filtro a 5 µm (preferito)
Concentrazione Ultrafiltrazione, filtri a flusso tangenziale Dimensione delle pori (o NMWC), Pressione transmembrana (TMP), Flusso, rapporto tra volume del filtrato e area della membrana
Cromatografia in tre fasi Cromatografia di esclusione dimensionale (SEC) o cromatografia di filtrazione su gel (GFC) Lunghezza e diametro della colonna, composizione del tampone, volume di iniezione, composizione della fase mobile (adsorbimento e desorbimento), pH, velocità di flusso, condizioni di equilibrio, legame, lavaggio ed eluizione.
Cromatografia per affinità (AF)
Cromatografia per scambio anionico (AEX)
Concentrazione Ultrafiltrazione, filtri a flusso tangenziale Dimensione delle pori (o NMWC), Pressione transmembrana (TMP), Flusso, rapporto tra volume del filtrato e area della membrana
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