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Sintesi su misura di circRNA

Sintesi su misura di circRNA

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RNA IVT

Sintesi su misura di circRNA

Il mRNA circolare (circRNA) è stato ampiamente utilizzato nello studio delle funzioni di geni o proteine. Allo stesso tempo, è popolare nello sviluppo di biologici profilattici e terapeutici, simili al mRNA.

Yaohai Bio-Pharma ha sviluppato un insieme di tecnologie di sintesi di circRNA per fornire RNA di alta qualità, come il progetto e l'ottimizzazione delle sequenze, la trascrizione in vitro (IVT), la circularizzazione, la purificazione e l'incapsulamento in nanoparticelle lipidiche (LNP). Tutti i prodotti vengono rilasciati secondo standard rigorosi di controllo della qualità (QC).

Applicazioni di CircRNA

In confronto all'mRNA lineare, l'RNA circolare (circRNA) è più stabile a livello strutturale e rappresenta un principale punto caldo della ricerca attuale sui farmaci acidi nucleici. Ha un ampio spettro di applicazioni in vari campi, sia come circRNA codificante che non codificante, inclusi vaccini preventivi per malattie infettive, vaccini oncologici terapeutici, farmaci oncologici terapeutici, terapia di sostituzione proteica, medicina rigenerativa, terapia cellulare e genica (CGT), ruolo di spugna molecolare ed aptameri RNA.

Dettagli del servizio
Processo Servizio Opzionale Dettagli del servizio Periodo di Consegna (giorni)
progettazione e Ottimizzazione della Sequenza circRNA Progettazione e ottimizzazione delle sequenze codificanti Ottimizzazione del codone CDS 1
Progettazione e ottimizzazione di sequenze non codificanti Progettazione e Ottimizzazione delle Sequenze degli Intron e degli Esone, Braccia Omolette e Spaziatori 1-2
Preparazione del Plasmide Circolare Sintesi genica Sintesi di Gene (Terze parti) 7-10
Amplificazione del Plasmide Amplificazione del Plasmide 2
Estrazione del Plasmide
Preparazione di Plasmidi Lineari Linearizzazione e purificazione di plasmidi Linearizzazione del plasmide 1
Purificazione del DNA Linearizzato
Trascrizione in Vitro e Ciclizzazione Trascrizione in Vitro e Ciclizzazione Reazioni di Trascrizione in Vitro e Ciclizzazione 1-2
Digestione con RNase R
Ottimizzazione-opzionale Composizione della Reazione, Ottimizzazione del Tempo 2-5
purificazione del circRNA Metodo Convenzionale di Purificazione Precipitazione con cloruro di litio 1
Purificazione con paramagnetici 1
Purificazione di circRNA Altamente Puro Cromatografia Liquida ad Alta Prestazione (HPLC) Preparativa 1-2
Scambio di tampone Ultrafiltrazione 1
liofilizzazione del circRNA Riempimento del Campione Riempimento 2-3
Liofilizzazione Precongelamento
Essicazione primaria (sottrazione)
Essicazione secondaria (disassorbimento)
incapsulazione circRNA-LNP Incapsulamento LNP Pretreatment del Materiale e del Liquido 2
Mescolamento con Dispositivo Microfluico
Scambio di tampone Filtrazione a Flusso Tangenziale 1
Sterilizzato Filtrazione
Controllo della Qualità del DNA Plasmidico Concentrazione/purità Spettrofotometria Ultravioletta (UV) 1-2
Conformazione del Plasmide Elettroforesi su Gel di Agarosio (AGE)
Elettroforesi Capillare (CE)-Opzionale
Identificazione del Plasmide Identificazione dell'Enzima di Ristrizione/AGE
Controllo qualità del circRNA Concentrazione/purità Spettrofotometria Ultravioletta (UV) -
Purezza Elettroforesi su Gel di Agarosio (AGE)/E-Gel 0.5
HPLC-opzionale 1
Controllo di Qualità del circRNA-LNP Efficienza di incapsulamento Metodo RiboGreen 1
Dimensione delle Particelle Dispersione di Luce Dinamica (DLS) 1
Indice di Polidispersione Dispersione di Luce Dinamica (DLS) 1
Potenziale Zeta Dispersione di Luce Dinamica (DLS) 1
Analisi della Potenza a Base Cellulare Trasfezione cellulare Imbracatura cellulare, trasfezione cellulare 4
Rilevazione della Proteina Obiettivo Osservazione al fluorescenza, Western Blot/ELISA 1-3
Studio di caso

Abbiamo trasfettato nelle cellule 293T l'RNR circolare del proteina fluorescente verde migliorata (eGFP circRNA), l'RNR circolare mCherry, e l'RNR circolare luciferasi, e abbiamo rilevato la proteina obiettivo attraverso segnali fluorescenti, luminescenti o cromatici, western blot (WB), test enzimatico immunoassay (ELISA).

Analisi della Potenza a Base Cellulare dei Campioni circRNA da Yaohai Bio-Pharma

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