I prodotti ottenuti tramite ciclizzazione in vitro e arricchimento con RNase R richiedono un ulteriore rimozione dalla trascrizione in vitro (IVT), inclusi i substrati non consumati nella reazione di ciclizzazione, i sottoprodotti della reazione e l'RNA incrinato.
Yaohai Bio-Pharma dispone di soluzioni mature di precipitazione al LiCl, purificazione con palline magnetiche, purificazione auto-sviluppata e altre soluzioni di purificazione diversificate per rimuovere efficacemente vari impurità e preparare circRNA altamente puro.
Soluzione di purificazione per piccole quantità di circRNA per la trasfusione cellulare e come parte degli esperimenti su animali.
Soluzione di purificazione per piccole quantità di circRNA per la trasfusione cellulare e come parte degli esperimenti su animali.
Scenari applicativi con qualità superiore;
Processo di purificazione stabile e scalabile per soddisfare i requisiti di produzione GMP.
Processo | Servizio Opzionale | Dettagli del servizio | Periodo di Consegna (giorni) | Consegne |
purificazione circRNA | Soluzione di purificazione convenzionale | Precipitazione con cloruro di litio | 1 | sostanza farmaceutica circRNA |
Purificazione con paramagnetici | ||||
Purificazione di circRNA Altamente Puro | Cromatografia liquida ad alta prestazione preparativa (HPLC) | 1-2 | ||
Scambio di tampone | Ultrafiltrazione | 1 | ||
controllo della qualità circRNA | Concentrazione\/purificazione | Spettrofotometria Ultravioletta (UV) | 0.5 | Rapporto di prova |
Purezza | Elettroforesi su Gel di Agarosio (AGE)/E-Gel | |||
HPLC-opzionale | 1 |
Possono essere realizzati scenari di applicazione.
circRNA con una purezza superiore al 90%;
Attraverso un rigoroso controllo delle RNasi nell'ambiente sperimentale e nei consumabili, si preclude efficacemente la degradazione dell'RNA.
Yaohai Bio-Pharma ha sviluppato una soluzione matura per la purificazione di circRNA che può rimuovere efficacemente vari impurità correlate al processo.
I prodotti di RNA circolare purificati con la soluzione convenzionale sono ancora chiaramente misti ad RNA frammentati ed introni.
Dopo l'utilizzo della soluzione di purificazione sviluppata da Yaohai Bio-Pharma, varie impurità di RNA lineari, come RNA frammentati ed introni, possono essere rimosse con successo.
validazione dell'espressione di circRNA
Utilizzando un liposoma convenzionale, il circRNA eGFP purificato viene trasfettato in cellule 293T e viene osservato un segnale di fluorescenza dopo 24 ore, che continua ad aumentare a 48 ore. Il segnale di fluorescenza è ancora rilevabile al settimo giorno e al quattordicesimo giorno dopo la trasfessione.