mRNA-Plasmidvorlagen: Schlüsselelemente und Designstrategien

Die Herstellung von mRNA für Impfstoffe oder Therapien beginnt mit einer gut konzipierten Plasmidvorlage. Hier finden Sie eine Kurzanleitung zu den wichtigsten Elementen und wie Sie diese für den Erfolg optimieren.

Der Veranstalter: Wo die Transkription beginnt

Der T7-Promoter ist die beliebteste Wahl zum Starten der mRNA-Synthese. Seine klassische Sequenz „TAATACGACTCACTATAGGG“ sorgt für eine effiziente Transkription. Im Laufe der Zeit haben Wissenschaftler Variationen wie die GG-, AG- und AT/AU-Vorlagen entwickelt, um mit fortschrittlichen Capping-Systemen wie CleanCap oder selbstamplifizierenden RNA-Plattformen zu arbeiten.

Linearisierung: Schneiden des Plasmids für Präzision

Um die endlose Transkription des Plasmids zu stoppen, muss es an einer bestimmten Stelle geschnitten werden. Enzyme vom Typ IIS wie BspQⅠ oder BsaⅠ sind für diese Aufgabe perfekt geeignet. Sie schneiden die DNA außerhalb ihrer Erkennungssequenz ab, lassen keine zusätzlichen Teile zurück und bewahren den entscheidenden PolyA-Schwanz.

Der mRNA-Bauplan: Bausteine ​​des Erfolgs

Die mRNA-Sequenz umfasst eine 5'-Kappe, nicht-translatierte Regionen (UTRs), eine codierende Sequenz (CDS) und einen PolyA-Schwanz. So ist jeder Teil aufgebaut:

• UTRs: Diese können von stark exprimierten natürlichen Genen (wie denen in Viren) übernommen oder mithilfe fortschrittlicher Algorithmen für eine bessere Leistung individuell entwickelt werden.
• CDS: Wissenschaftler entwerfen zunächst die Protein-Sequenz und optimieren dann den DNA-Code für eine effiziente Expression.
• PolyA-Schwanz: Ein Abschnitt von 100–120 Adeninen oder eine segmentierte Version wie 30A + Linker + 70A stellt sicher, dass die mRNA stabil und funktionsfähig bleibt.

Durch die Beherrschung dieser Elemente können Forscher leistungsstarke mRNA-Vorlagen für alles von Impfstoffen bis hin zu hochmodernen Therapien erstellen. Die Zukunft der Medizin beginnt hier!

Yaohai Bio-Pharma ist ein Plattformunternehmen, das sich auf Dienstleistungen für mikrobielle Expressionssysteme spezialisiert hat. Auf Grundlage eines Jahrzehnts an Erfahrung hat Yaohai eine umfassende Suite GMP-konformer Technologien zur Synthese linearer und zirkulärer mRNA entwickelt und bietet hochwertige RNA-Produkte an, die Sequenzdesign und -optimierung, Gensynthese, In-vitro-Transkription (IVT), Zirkularisierung, RNA-Reinigung und LNP-Verkapselung umfassen.

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