Nutzung bakterieller IBs für die rekombinante Proteinproduktion

Bakterielle Einschlusskörper (IBs) in der rekombinanten Proteinproduktion bieten eine einfache Trennung, Stabilität, hohe Expression und Abbauresistenz und können toxische Proteine ​​mit biologischer Aktivität exprimieren. Fortschritte im Verständnis von IBs eröffnen neue Wege für die Verarbeitung, wobei Herausforderungen und Lösungen für zukünftige Forschung identifiziert werden.

Yaohai Bio-Pharma verfügt über mehr als 10 Jahre Erfahrung in der Produktion rekombinanter Proteine ​​mithilfe mikrobieller Fermentationssysteme. Unser starkes und professionelles Expertenteam garantiert, dass das gereinigte, neu gefaltete Protein 1.5 g/l erreichen kann.

Verarbeitungsstrategien und Herausforderungen von IBs

Trennung von IBs Methoden zur IB-Trennung hängen von der Proteinstruktur und -funktion sowie den Anwendungsanforderungen ab. Physikalische Methoden zerstören Zellen, können aber die Proteinqualität beeinträchtigen. Enzymatische Methoden verbessern die Reinheit, sind aber kostspielig. Sanfte Detergenzien funktionieren bei klassischen IBs, nicht bei nicht-klassischen. Die pH-Kontrolle ist für die Löslichkeit entscheidend. Die elektrophoretische Abscheidung ist einfach, aber für biologisch aktive Proteine ​​nicht skalierbar.

Solubilisierung von IBs Die Solubilisierung von IBs ist für die Rückgewinnung aktiver Proteine ​​entscheidend. Starke Denaturierungsmittel schädigen die native Struktur, während Nicht-Denaturierungsmittel für klassische IBs nicht geeignet sind. Sanfte Solubilisatoren können IBs auflösen und gleichzeitig die Proteinstruktur schützen, aber nicht alle Proteine. Zukünftige Arbeiten erfordern bessere Algorithmen zur Auswahl von Solubilisatoren.

Renaturierungsstrategien Die Renaturierung von Proteinen ist für die Funktionalität von entscheidender Bedeutung. Die Renaturierung in vitro ist mit Herausforderungen verbunden. Die Wahl des Lösungsvermittlers, die Proteinkonzentration, die Bedingungen und die Methoden beeinflussen das Ergebnis. Sanfte Lösungsvermittler schützen die native Struktur und verbessern die Qualität. Moderate Konzentrationen und optimierte Bedingungen reduzieren die Aggregation. Säulenbasierte Methoden mit monolithischen Matrizen bieten höhere Reinheit und Ausbeute.

Reinigung renaturierter Proteine Eine weitere Reinigung trennt fehlgefaltete von korrekt gefalteten Proteinen. Die traditionelle Chromatographie hat bei ähnlichen Proteinen Probleme. Alternative Methoden bieten Vorteile, erfordern jedoch eine zielproteinspezifische Auswahl. Die Entwicklung einer universellen Reinigungsmethode bleibt eine Herausforderung.

Schlussfolgerung

IBs bieten Vorteile bei der rekombinanten Proteinproduktion, stellen jedoch Herausforderungen bei der Verarbeitung dar. Mit einem tieferen Verständnis der Proteinstruktur-Funktion in IBs und Fortschritten bei der Trennung, Solubilisierung, Renaturierung und Reinigung könnte bald eine Hochdurchsatzgewinnung aktiver Proteine ​​erreicht werden. Dies wird die Kosten senken und die biopharmazeutische Forschung und Entwicklung beschleunigen und das Branchenwachstum vorantreiben.

Yaohai Bio-Pharma ist außerdem aktiv auf der Suche nach institutionellen oder individuellen globalen Partnern und bietet die wettbewerbsfähigste Vergütung der Branche. Wenn Sie Fragen haben, können Sie uns gerne kontaktieren: [email protected]

Weitere Einzelheiten zu Yaohai Bio-Pharma finden Sie auf der Website: www.yaohaibio-pharma.com