Nutzung bakterieller IBs für die Produktion rekombinanter Proteine

Bakterielle Inklußkörper (IBs) bei der Produktion rekombinanter Proteine bieten eine einfache Trennung, Stabilität, hohen Ausdruck und Fehlertoleranz sowie die Möglichkeit, toxische Proteine mit biologischer Aktivität auszudrücken. Fortschritte im Verständnis von IBs eröffnen neue Wege für die Verarbeitung, wobei Herausforderungen und Lösungen für zukünftige Forschung identifiziert wurden.

Yaohai Bio-Pharma verfügt über mehr als 10 Jahre Erfahrung in der Produktion rekombinanter Proteine unter Verwendung von mikrobiellen Fermentierungssystemen. Unser starkes und professionelles Team von Experten gewährleistet, dass das gereinigte und wieder gefaltete Protein eine Konzentration von 1,5 g/L erreichen kann.

Verarbeitungsstrategien und Herausforderungen von IBs

Trennung von IBs Methoden für die Trennung von IBs hängen von der Proteine-Struktur-Funktion und den Anwendungsanforderungen ab. Physikalische Methoden stören Zellen, können jedoch die Proteinkualität beeinträchtigen. Enzymatische Methoden verbessern die Reinheit, sind aber teuer. Sanfte Detergentien eignen sich für klassische IBs, nicht aber für nicht-klassische. Die pH-Wert-Kontrolle ist entscheidend für die Löslichkeit. Elektrophorese-Deposition ist einfach, aber nicht skalierbar für biologisch aktive Proteine.

Auflösung von IBs Die Auflösung von IBs ist entscheidend für die Rückgewinnung aktiver Proteine. Starke Denaturationsmittel schaden der nativen Struktur, während nicht-denaturierende Mittel nicht für klassische IBs geeignet sind. Sanfte Auflösungsmittel können IBs auflösen, während sie die Proteinstruktur schützen, aber nicht bei allen Proteinen. Zukünftige Arbeiten benötigen bessere Algorithmen zur Auswahl von Auflösungsmitteln.

Renaturierungsstrategien Die Renaturierung von Proteinen ist für deren Funktionalität entscheidend. Die in vitro Renaturierung steht vor Herausforderungen. Die Wahl des Solubilisators, die Proteinkonzentration, die Bedingungen und die Methoden beeinflussen das Ergebnis. Sanfte Solubilisatoren schützen die native Struktur und verbessern die Qualität. Mäßige Konzentrationen und optimierte Bedingungen reduzieren die Aggregation. Spaltbasierte Methoden mit monolithischen Matrizen bieten höhere Reinheit und Erträge.

Reinigung renaturierter Proteine Weitere Reinigung trennt falsch gefaltete von korrekt gefalteten Proteinen. Traditionelle Chromatographie hat Probleme mit ähnlichen Proteinen. Alternative Methoden bieten Vorteile, erfordern aber eine auf das Zielprotein abgestimmte Auswahl. Die Entwicklung einer universellen Reinigungs methode bleibt eine Herausforderung.

Schlussfolgerung

IBs bieten Vorteile bei der Produktion rekombinanter Proteine, stellen aber Verarbeitungsherausforderungen dar. Mit einem tieferen Verständnis von Struktur-Funktion von Proteinen innerhalb von IBs und Fortschritten in Trennung, Lösung, Renaturierung und Reinigung könnte die Hochdurchsatz-Rückgewinnung aktiver Proteine bald erreicht werden. Dies wird Kosten senken und die biopharmazeutische Forschung und Entwicklung beschleunigen, was das Wachstum der Branche antreibt.

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