2024 Aktualisierte mRNA-Reinigungsverfahren

Reinigung, ein entscheidender Schritt bei der mRNA-Produktion, beinhaltet das Entfernen von Unreinheiten wie unverreakten Chemikalien oder Rückstandsmaterialien.

Der Reinigungsprozess stellt eine Konsistenz von Batch zu Batch bei mRNA und Lipidnanopartikel (LNP)-Formulierungen sicher, indem instabile Komponenten entfernt und dadurch deren Bioverfügbarkeit und Wirksamkeit in vivo verbessert werden.

Hier sind einige gängige Reinigungsmethoden:

1. Lithiumchloridpräzipation : RNA bildet Komplexe mit Lithiumchlorid und Alkohol, die sich abscheiden, gefolgt von einer Zentrifugation zur Trennung des RNA-Abschlags zur Reinigung;

2. Magnetperlenreinigung: Oberflächenmodifizierte Magnetperlen binden sich selektiv an RNA, was eine schnelle und effiziente Reinigung durch kontrollierte Bewegung mit einem Magnetfeld ermöglicht;

3. Affinitätschromatographie: Verwendung der Affinität zwischen mRNA PolyA und Oligo dT zur Bindung von RNA und Entfernung von Unreinheiten;

4. Ionenenaustauschchromatographie: Indem man die Unterschiede in den Wechselwirkungen zwischen RNA und Ionaustauschgruppen nutzt, wird die Trennung und Reinigung von RNA durch Anpassung der Ionenstärke und des pH-Werts in der Ionaustauschsäule erreicht.

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