2024 Aktualisierte mRNA-Reinigungsmethoden

Bei der Reinigung, einem entscheidenden Schritt bei der mRNA-Produktion, geht es darum, Verunreinigungen wie nicht umgesetzte Chemikalien oder Reststoffe zu entfernen.

Der Reinigungsprozess gewährleistet die Chargenkonsistenz der mRNA- und Lipid-Nanopartikel-Formulierungen (LNP), entfernt instabile Komponenten und verbessert so ihre Bioverfügbarkeit und Wirksamkeit in vivo.

Hier sind einige gängige Reinigungsmethoden:

1. Lithiumchloridfällung: RNA bildet Komplexe mit Lithiumchlorid und Alkohol, fällt aus, anschließend wird der RNA-Niederschlag durch Zentrifugation abgetrennt und gereinigt;

2. Reinigung magnetischer Perlen: Oberflächenmodifizierte magnetische Kügelchen binden selektiv an RNA und ermöglichen so eine schnelle und effiziente Reinigung durch kontrollierte Bewegung mit einem Magnetfeld.

3. Affinitätschromatographie: Ausnutzung der Affinität zwischen mRNA-PolyA und Oligo-dT, um RNA zu erfassen und Verunreinigungen zu entfernen;

4. Ionenaustauschchromatographie: Durch Ausnutzung der Unterschiede in den Wechselwirkungen zwischen RNA und Ionenaustauschergruppen werden Trennung und Reinigung von RNA durch Anpassung der Ionenstärke und des pH-Werts in der Ionenaustauschersäule erreicht.

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