alle kategorier
ENEN
Tag-fri proteinforberedelse tjenester

Tag-fri proteinforberedelse tjenester

Hjem >  Tag-fri proteinforberedelse tjenester

Tag-fri proteinforberedelse tjenester

Proteinmærker, som fusionspartnere, der anvendes i rekombinante DNA-teknologier, muliggør effektiv enkelttrins affinitetsoprensning for forskellige proteiner/peptider med forskellige egenskaber. På trods af denne vigtige fordel kan tags som eksogene aminosyrer ændre proteinstrukturen og biologiske funktioner. Derfor er ikke-mærkede (tag-fri) proteiner eller peptider mere foretrukne for at sikre sikkerhed og effektivitet, især inden for det biofarmaceutiske område. Et rekombinant protein med et fusionsmærke har begrænsede muligheder for at opnå tilladelse fra læge-/lægemiddeladministrationsbureauer.

Baseret på den mikrobielle biologiske R&D-platform tilbyder Yaohai Bio-Pharma tilpassede ikke-mærkede (Tag-fri) proteinpræparationstjenester dedikeret til at opfylde unikke mål for forskning, udvikling og fremstilling til klinisk brug.

Nøgleord: tag-fri proteinproduktion, ikke-mærket proteinoprensning, gratis tag-baseret proteinpræparat, tagfri proteinekspression og oprensning, yderst tag-frit målprotein Anvendelse: humanmedicinsk forskning, udvikling af dyremedicin, udvikling af rekombinant vaccine, rekombinant stort molekyle produktion af biologiske stoffer


Vores mikrobielle R&D-platform

Vi har erfaring med mikrobiel stammeteknik, fermentering og produktrensning.

Bakterier: Escherichia coli (E. coli)

Gær: Pichia pastoris (P. pastoris), Saccharomyces cerevisiae (S. cerevisiae), Hansenula polymorpha (H. polymorpha)

Tilpassede muligheder

ModalitetRekombinant protein
UdgangsmaterialerGensekvenser, rekombinant plasmid eller manipulerede stammer
LeverancerRens: >80%, >85%, >90% Mængde: 0.2~10 g (afgøres af projektet)
Udtrykssystem og dannelseE. coli periplasmatisk sekretion, opløseligt og inklusionslegemeekspression; Gær intracellulær eller sekretionsekspression
AnalysemetoderUltraviolet (UV), bicinchoninsyre-assay (BCA), Bradford eller Lowry for QuantityNatriumdodecyl-sulfat polyacrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE) til oprensningstest.Valgfrit: Western blot (WB), enzymbundet immunosorbentanalyse (ELISA), høj ydeevne væskekromatografi (HPLC)
Resterende urenhederEndotoksin (valgfrit)

Tjenester detaljer

TjenesterService detaljerMinimal tidslinje (arbejdsdag)
GensynteseKodonoptimering for specifik ekspressionsvært7 ~ 10 dag
Gensyntese
Plasmid/vektor konstruktionKloning ind i plasmid/vektor2 dage
Plasmid transformation
Verifikation af polymerasekædereaktion (PCR), restriktionsenzymfordøjelse, gensekventering3 dage
Proteinekspression i E. coliPlasmid transformation,2 dage
Dyrkning i rystekolbe3 dage
7L-sacle gæring, optimering4 dage/batch
Tag-fri proteinoprensning, optimering5 ~ 10 dage / batch
Test ved natriumdodecyl-sulfat polyacrylamidgelelektroforese (SDS-PAGE)
Proteinekspression i gærGær kompetente celler forberedelse4 dage
Plasmid linearisering og elektrotransformation
7L-sacle gæring, optimering5 dage
Tag-fri proteinoprensning, optimering7 dage/batch
Tag-fri proteinoprensning5 ~ 10 dage / batch
QC af SDS-PAGE

Yderligere tjenester (valgfrit)

Udvikling af fermenteringsproces

Tag-fri proteinrensningsprocesudvikling

Pilotopskalering og GMP-fremstilling

Analyse og test

Vores egenskaber

Vi har arbejdet på mere end 300 konstruerede mikrobielle stammer, herunder E. coli DH5α, TOP10, Trans10, BL21; P. pastoris SMD1168H, X-33, GS115; PichiaPink stamme 1/2/3/4; og H. polymorpha.

Vi har erfaring med E. coli periplasmatisk sekretion, opløselig og inklusions kropsekspression, såvel som gær intracellulær eller sekretionsekspression.

Vi etablerer en high-throughput screeningsplatform til screening af højproducerende og stabile stammer fra over hundrede kandidatstammer.

Få et gratis tilbud

Kontakt os