Plasmied DNA, as vitro transkripsie (IVT) sjabloon, is 'n improtante grondstof vir mRNA vervaardiging. Hoë opbrengs, hoë suiwering en hoë herwinning van plasmied DNA is die belangrikste doel tydens plasmied proses ontwikkeling.
Yaohai Bio-Pharma bied eenstopoplossing vir plasmiedontwikkeling, insluitend stroomop (fermentasie), stroomaf (suiwering) prosesontwikkeling en proseskarakterisering en prosesvalidering. Ons het uitgebreide ondervinding om plasmiedopbrengs te verbeter en dit van komplekse matrikse te isoleer deur fermentasie-, suiwerings- en onsuiwerheidsverwyderingsprosesse te ontwikkel en te optimaliseer.
Basiese bioproses vir plasmiedvervaardiging sluit in: Escherichia coli (E. coli) fermentasie, sel-oes en alkaliese lise, verheldering, konsentrasie, drie-stap chromatografie proses (vaslegging, intermediêre suiwering en polering), en konsentrasie.
Diensbesonderhede | Eenheid Bedryf | Grense |
E. coli fermentasie |
Skud fles | Mediasamestellings, antibiotika, inokulumvolume, groeitemperatuur, ens. |
Fermentor (7 liter) |
Antibiotikum, inokulumvolume, groeitemperatuur, pH, opgeloste suurstof (DO), voedingsmodus (bv. voer-batch), voedingsmedia, fermentasietyd, ens. |
|
Sel oes | mikrofiltrasie | Standard E. coli oesproses |
Sellise | Selhersuspensie, alkaliese lise, neutralisasie | Alkaliverhouding, lysistyd |
Clarification | Filtration | Ru-filtrasie, 20 µm en 'n 5 µm-filtertrein (verkieslik) |
Konsentrasie | Ultrafiltrasie, tangensiële vloeifiltrasie | Poriegrootte (of NMWC), Transmembraandruk (TMP), Flux, filtraatvolume tot membraanoppervlakverhouding |
Drie-stap chromatografie | Grootte-uitsluitingschromatografie (SEC), of gelfiltrasiechromatografie (GFC) | Kolomlengte en deursnee, buffersamestelling, inspuitvolume, mobiele fasesamestelling (adsorpsie en desorpsie), pH, vloeitempo, ekwilibrasie, binding, was- en elueringstoestande. |
Affiniteitschromatografie (AF) | ||
Anioonuitruilchromatografie (AEX) | ||
Konsentrasie | Ultrafiltrasie, tangensiële vloeifiltrasie | Poriegrootte (of NMWC), Transmembraandruk (TMP), Flux, filtraatvolume tot membraanoppervlakverhouding |
Meer biologiese suiweringsprosesoplossings |