Відповідно до центральної догми, інформаційна РНК (мРНК) є містком для передачі генетичного матеріалу від ДНК до білків.
мРНК відіграє біологічну роль, кодуючи білки in vivo, а зріла мРНК в еукаріотичних організмах складається з п’яти компонентів: 5' Cap (структура кепки), 5' UTR (некодуюча область), ORF (відкрита рамка зчитування), 3' UTR , і 3' polyA хвіст (поліаденілатний хвіст).
Деталі послуг
| Процес |
Додаткова послуга |
Сервісні деталі |
Період доставки (день) |
| Дизайн та оптимізація послідовності мРНК |
Проектування та оптимізація послідовностей кодування |
Вирівнювання послідовності CDS
Оптимізація кодонів CDS
|
1 |
| Проектування та оптимізація некодуючих послідовностей |
Проектування та оптимізація послідовності 5' UTR
Проектування та оптимізація послідовності 3' UTR
проектування й оптимізація послідовності polyA
|
1-2 |
Параметри, що настроюються
| 5' UTR/3' UTR |
- Послідовність UTR природи
- Мутантна/сконструйована послідовність UTR
|
| 3' PolyA хвіст |
- 100A ~120A Хвіст (рекомендовано)
- Сегментований поліА хвіст
- Інший спеціальний хвіст
|
Загальні стратегії для проектування послідовності мРНК
| Компоненти мРНК |
Біологічні функції |
Стратегії оптимізації |
| 5' Cap |
Захист мРНК від деградації екзонуклеазами та діє спільно з хвостом polyA на 3'-кінці, білком, що зв’язує polyA, і білком фактора ініціації трансляції, щоб ініціювати трансляцію білка. |
Природна структура Cap1 уникає рецепторів розпізнавання образів і, таким чином, знижує природну імунну відповідь, чого можна досягти за допомогою одноетапного котранскрипційного блокування або двоетапного ферментативного блокування [докладнішу інформацію див. у ферментативному блокуванні мРНК і котранскрипційному блокуванні]. |
| 5' UTR |
5' UTR може розпізнаватися рибосомами, регулювати трансляцію мРНК і впливати на стабільність мРНК. |
Містять послідовності Козака без дуже стабільної вторинної структури. Для мРНК транскрипції in vitro (IVT), таких як α-глобін і β-глобін, перевагу надають природним UTR високоекспресованих генів. |
| CDS |
Ділянки, що кодують білки, і послідовності, що кодують антигени, антитіла або інші функціональні білки. |
Оптимізація кодонів підвищує рівень трансляції, зазначаючи, що певні неоптимальні кодони можуть відігравати певну роль у згортанні білка. |
| 3' UTR |
Регулюють трансляцію та стабільність мРНК. |
Для мРНК IVT, таких як α-глобін і β-глобін, переважні природні UTR високоекспресованих генів. |
| 3' polyA хвіст |
Регулюють експресію білка та захищають структуру кришки від деградації. |
Потрібна адекватна довжина (100-150 bp); кодування хвоста polyA на плазміді матриці транскрипції забезпечує більш визначену довжину хвоста polyA. |
Наші особливості
- Диверсифікований вибір джерела UTR
Численні джерела високо виражених природних і модифікованих бібліотек UTR; зріла стратегія модифікації UTR;
- Передова команда з оптимізації CDS
Співпрацюйте з командою професійних алгоритмів AI, щоб завершити оптимізацію кодонів.
- Рівномірний розподіл хвоста polyA
Додайте послідовності polyA відповідно до шаблонів ДНК, щоб точніше контролювати довжину мРНК.
- Різноманітні комбінації оптимізації
Досягти ефективної експресії мРНК з низькою імуногенністю.
Вивчення проблеми
Дизайн послідовності подвійної репортерної мРНК: мРНК mCherry-eGFP
Сервіс мРНК компанії Yaohai Bio-Pharma продовжує вдосконалюватись шляхом розробки та оптимізації тандемної послідовності подвійного репортерного гена, що забезпечує спільну експресію подвійних генів.
Використовуючи звичайний трансфекційний реагент, мРНК подвійної генної тандемної послідовності mCherry-eGFP трансфікується в клітини 293T, і два флуоресцентні сигнали mCherry (червоний) і посилений зелений флуоресцентний білок (eGFP) виявляються з одночасною експресією через 48 годин, і складені графік виділено жовтим кольором.
Експресія мРНК mCherry-eGFP в клітині 293T
UK
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
