всі категорії
Проектування послідовності мРНК

Проектування послідовності мРНК

Відповідно до центральної догми, інформаційна РНК (мРНК) є містком для передачі генетичного матеріалу від ДНК до білків.

мРНК відіграє біологічну роль, кодуючи білки in vivo, а зріла мРНК в еукаріотичних організмах складається з п’яти компонентів: 5' Cap (структура кепки), 5' UTR (некодуюча область), ORF (відкрита рамка зчитування), 3' UTR , і 3' polyA хвіст (поліаденілатний хвіст).

невизначених

Деталі послуг
ПроцесДодаткова послугаСервісні деталіПеріод доставки (день)
Дизайн та оптимізація послідовності мРНКПроектування та оптимізація послідовностей кодування

Вирівнювання послідовності CDS

Оптимізація кодонів CDS

1
Проектування та оптимізація некодуючих послідовностей

Проектування та оптимізація послідовності 5' UTR

Проектування та оптимізація послідовності 3' UTR

проектування й оптимізація послідовності polyA

1-2
Параметри, що настроюються
5' UTR/3' UTR
  • Послідовність UTR природи
  • Мутантна/сконструйована послідовність UTR
3' PolyA хвіст
  • 100A ~120A Хвіст (рекомендовано)
  • Сегментований поліА хвіст
  • Інший спеціальний хвіст
Загальні стратегії для проектування послідовності мРНК
Компоненти мРНКБіологічні функціїСтратегії оптимізації
5' CapЗахист мРНК від деградації екзонуклеазами та діє спільно з хвостом polyA на 3'-кінці, білком, що зв’язує polyA, і білком фактора ініціації трансляції, щоб ініціювати трансляцію білка.Природна структура Cap1 уникає рецепторів розпізнавання образів і, таким чином, знижує природну імунну відповідь, чого можна досягти за допомогою одноетапного котранскрипційного блокування або двоетапного ферментативного блокування [докладнішу інформацію див. у ферментативному блокуванні мРНК і котранскрипційному блокуванні].
5' UTR5' UTR може розпізнаватися рибосомами, регулювати трансляцію мРНК і впливати на стабільність мРНК.Містять послідовності Козака без дуже стабільної вторинної структури. Для мРНК транскрипції in vitro (IVT), таких як α-глобін і β-глобін, перевагу надають природним UTR високоекспресованих генів.
CDSДілянки, що кодують білки, і послідовності, що кодують антигени, антитіла або інші функціональні білки.Оптимізація кодонів підвищує рівень трансляції, зазначаючи, що певні неоптимальні кодони можуть відігравати певну роль у згортанні білка.
3' UTRРегулюють трансляцію та стабільність мРНК.Для мРНК IVT, таких як α-глобін і β-глобін, переважні природні UTR високоекспресованих генів.
3' polyA хвістРегулюють експресію білка та захищають структуру кришки від деградації.Потрібна адекватна довжина (100-150 bp); кодування хвоста polyA на плазміді матриці транскрипції забезпечує більш визначену довжину хвоста polyA.
Наші особливості
  • Диверсифікований вибір джерела UTR

Численні джерела високо виражених природних і модифікованих бібліотек UTR; зріла стратегія модифікації UTR;

  • Передова команда з оптимізації CDS

Співпрацюйте з командою професійних алгоритмів AI, щоб завершити оптимізацію кодонів.

  • Рівномірний розподіл хвоста polyA

Додайте послідовності polyA відповідно до шаблонів ДНК, щоб точніше контролювати довжину мРНК.

  • Різноманітні комбінації оптимізації

Досягти ефективної експресії мРНК з низькою імуногенністю.

Вивчення проблеми

Дизайн послідовності подвійної репортерної мРНК: мРНК mCherry-eGFP

Сервіс мРНК компанії Yaohai Bio-Pharma продовжує вдосконалюватись шляхом розробки та оптимізації тандемної послідовності подвійного репортерного гена, що забезпечує спільну експресію подвійних генів.

Використовуючи звичайний трансфекційний реагент, мРНК подвійної генної тандемної послідовності mCherry-eGFP трансфікується в клітини 293T, і два флуоресцентні сигнали mCherry (червоний) і посилений зелений флуоресцентний білок (eGFP) виявляються з одночасною експресією через 48 годин, і складені графік виділено жовтим кольором.

图片

图片

Експресія мРНК mCherry-eGFP в клітині 293T

Отримайте безкоштовне котирування

Зв'яжіться з нами!