Значення аналізу ефективності мРНК
Зі швидким розвитком мРНК-вакцин і терапевтичних засобів необхідна спеціальна панель методів аналізу для перевірки ефективності (визначення їхньої біологічної активності), включаючи ефективність трансляції мРНК. Ці методи зазвичай базуються на трансфекції клітин і функціональних аналізах цільового білка.
Yaohai Bio-Pharma пропонує клітинні аналізи ефективності мРНК лікарських речовин або продуктів LNP, включаючи трансфекцію клітин (клітини 293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 тощо), а також аналізи ELISA або Вестерн-блот (ВБ).
Нормативні вимоги до аналізів ефективності
Відповідно до регуляторних міркувань ВООЗ, «Ефективність кожної партії кінцевої вакцини повинна визначатися за допомогою відповідного кількісного та перевіреного функціонального методу(ів). Потенційні аналізи ефективності in vitro можуть включати клітинні системи трансфекції або безклітинні аналізи». А USP рекомендував «клітинний аналіз» для перевірки ефективності мРНК, тобто експресії цільового білка.
Процедура
Крок 1. Клітинна трансфекція мРНК або мРНК-LNP
Клітини культивують і трансфікують мРНК або мРНК-LNP. Зокрема, мРНК трансфікують після змішування з реагентом для трансфекції, тоді як мРНК-LNP безпосередньо трансфікують у клітини. Через 24-48 годин очистіть супернатант, що містить експресований білок, центрифугуванням.
Етап 2. Функціональні аналізи цільового білка
Виконайте аналізи ELISA або WB для оцінки функціонального зв’язування цільових білків.
Вивчення проблеми
Клітинний аналіз ефективності зразків мРНК
Yaohai-BioPharma розробила клітинний метод аналізу ефективності для мРНК, що включає культуру клітин, трансфекцію клітин і функціональні аналізи білка. Ми трансфікували мРНК eGFP, мРНК mCherry, мРНК люциферази, мРНК шипового білка в клітини 293T і виявили цільовий білок за допомогою флуоресценції, люмінесцентного або кольорового сигналу, WB, ELISA.
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
НЕМАЄ
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
