Асайни потенціалу на основі клітин
Значення асай-тесту потужності mRNA
За швидким розвитком вакцин та лікарських засобів на основі mRNA необхідно спеціальний набір методів аналізу для тестування потужності (визначення їх біологичної активності), який включає ефективність перекладу mRNA. Ці методи, як правило, базуються на трансфекції клітин та функціональних тестах цільового белка.
Yaohai Bio-Pharma пропонує клітинні асай-тести на потужність для речовин mRNA чи продукції LNP, включаючи трансфекцію клітин (293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 клітин тощо) та асай ELISA або западний блотинг (WB).
Регуляторні вимоги до тестів потужності
За розглядами регуляційних органів WHO, «Потужність кожної партії остаточної вакцини повинна визначатися за допомогою відповідно кількісного та перевіреного функціонального методу(в). Потенційні in vitro асайи потужності можуть включати клітинні системи трансфекції або безклітинні асайи». А USP рекомендує «клітинний асай» для тестування потужності mRNA, тобто вираження цільового белка.
Аналітичний метод
|
Аналіз
|
Методи
|
|
Асайи потужності
|
Клітинна трансфекція та ідентифікація цільового белка:
293T, HepG2, HeLa, K562, U937, Raw264.7 клітини тощо.
|
Процедура
Крок 1. Клітинна трансфекція mRNA або mRNA-LNP
Клітини виховуються та трансфікуються mRNA або mRNA-LNP. Детальніше, mRNA трансфікується після змішування з трансфекційним реагентом, тоді як mRNA-LNP безпосередньо трансфікується у клітини. Через 24-48 годин прояснюється супернатант, що містить виражений белок, шляхом центрування.
Крок 2. Функціональні асайи цільового белка
Виконуйте аналізи ELISA або WB для оцінки функціонального зв'язування цільових белків.
Вивчення випадку
Клітинні аналізи ефективності вибірки mRNA
Yaohai-BioPharma розробила клітинний метод аналізу ефективності mRNA, який включає клітинне культурування, трансфекцію клітин та функціональні аналізи белків. Ми трансфектували eGFP mRNA, mCherry mRNA, люциферазну mRNA, mRNA білок спайку до клітин 293T і виявили цільовий білок за допомогою флуоресцентного, люмінесцентного або забарвленого сигналу, WB, ELISA.
Клітинні аналізи ефективності продуктів mRNA від Yaohai Bio-Pharma
EN
AR
HR
CS
DA
NL
FI
FR
DE
EL
IT
JA
KO
NO
PL
PT
RO
RU
ES
SV
IW
ID
LV
LT
SR
SK
SL
UK
VI
ET
HU
TH
TR
FA
AF
MS
BE
MK
UR
BN
