Миникружна ДНК (мцДНК) је мањи невирусни ДНК вектор изведен из родитељске структуре сличне ДНК плазмида. Миникружна ДНК се разликује од конвенционалне плазмидне ДНК по томе што садржи промотор и ген од интереса (ГОИ), без порекла репликације (ОРИ) и селекционог маркера (селМарк). Миникружна ДНК се производи у бактеријама ин виво рекомбинацијом да би се уклониле додатне секвенце (зване мини-плазмид) из плазмидне ДНК. Због своје безбедности, ДНК миникруга је стекла популарност као невирусни вектор за генску терапију, ДНК вакцине итд.
Слика 1. Структура плазмидне ДНК (пДНК) и ДНК малог круга (мцДНК)
Миникружни системи за рекомбинацију ДНК
Постоје четири главна миникружна ДНК ин виво система рекомбинације која су проучавана, укључујући Пхаге λ интегразу, Пхаге П1 Цре рекомбиназу, ПарА резолвазу, ПхиЦ31 интегра се/И-СцеИ.
Стратегија
|
Фаг λ интеграза
|
Пхаге П1 Цре рекомбиназа
|
ПарА ресолвасе
|
ПхиЦ31 интегра се/И-СцеИ
|
Механизам
|
Тирозин рекомбиназа, која функционише преко протеина ФИС и ИХФ да катализује рекомбинацију атт хибридних места
|
Тирозин рекомбиназа специфична за место, која врши двосмерну рекомбинацију када се везује за локП места
|
Серинска рекомбиназа, која врши иреверзибилну и једносмерну рекомбинацију између два идентична МРС сајта
|
Серин рекомбиназа, која посредује у једносмерној рекомбинацији између аттП/аттБ везивних места, док И-СцеИ ендонуклеаза цепа нечистоће повезане са производом и нерекомбиновани родитељски плазмид
|
Карактеристике
|
Зависи од експресије фактора домаћина ФИС и ИХФ; интринзична токсичност; Резидуални родитељски плазмид и мини-плазмид
|
Резидуални родитељски плазмид и мини-плазмид
|
Висок принос; Резидуални родитељски плазмид и мини-плазмид
|
Смањен принос повезан са деградацијом родитељског плазмида
|
Иаохаи Био-Пхарма нуди ЦДМО решење на једном месту за миникруг ДНК
Референца:
[1] Алмеида АМ, Куеироз ЈА, Соуса Ф, Соуса А. Миникруг ДНК: Будућност вектора заснованих на ДНК? Трендс Биотецхнол. 2020. октобар;38(10):1047-1051. дои: 10.1016/ј.тибтецх.2020.04.008.